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목차

표제지=0,1,1

[제출문]=1,2,1

요약문=2,3,4

SUMMARY=6,7,1

CONTENTS=7,8,5

목차=12,13,4

제1장. 서론=16,17,4

제2장. 본론=20,21,1

제1절. 연구 개발 내용 및 방법=20,21,1

1. 레트로바이러스 gag-pol (env-) 발현 세포주의 제조=20,21,1

2. 인체 암세포 표적성 단쇄 인간화 항체 (humanized single-chain antibody) 발현 벡터 제조=20,21,3

3. 단쇄 인간화 항체와 레트로바이러스 외피 단백절편이 결합된 chimeric ligand (hybrid of humanized single chain antibody and retroviral envelope glycoprotein) 발현 벡터의 개발=22,23,1

가. GaLV-Env GP의 구조 및 기능 분석=22,23,3

나. scFv-GaLV ENV GP 융합 단백질 발현 벡터 제조=24,25,3

4. Western blotting을 통한 단쇄 항체-GaLV 외피 당단백질 (ScFv-GaLV Env GP) 키메릭 리간드 발현조사=26,27,2

5. ScFv-GaLV Env GP chimeric ligand가 display된 재조합 레트로바이러스에 의한 유전자 전달 효율의 조사=27,28,2

6. 인체 암표적성 인간화 단쇄 항체(humanized single-chain antibody) 생산 바이러스 포장 세포주의 제조=28,29,1

7. Viral titration=28,29,2

8. 증식성 레트로바이러스(RCR)의 검출 기술 확립=29,30,2

9. 개발된 면역 레트로좀의 인체 암세포 특이적 유전자 전달 및 발현 검증=30,31,2

10. Liposome과 Polybrene를 이용한 면역레트로즘의 감염 효율성의 비교조사=31,32,1

11. 암 전이 동물 모델의 구축=31,32,2

12. 암 전이 동물모델에서 표적 암세포 특이적인 유전자 전달효율의 조사=32,33,2

13.／3 암의 전이 억제 조사=33,34,2

제2절. 연구 결과=34,35,1

1. 레트로바이러스 gag-pol (env-) 발현 세포주의 개발=34,35,1

2. 인체 암세포 표적성 단쇄 인간화 항체 (humanized single-chain antibody) 발현 벡터 제조=34,35,4

3. 단쇄 인간화 항체와 레트로바이러스 외피 단백절편이 결합된 chimeric ligand (hybrid of humanized single chain antibody and retroviral envelope glycoprotein) 발현 벡터의 개발=37,38,1

가. GaLV-Env GP의 구조 및 기능 분석=37,38,9

나. ScFv-GaLV ENV GP 융합 단백질 발현 벡터 제조=45,46,5

4. 단쇄 항체-GaLV 외피당단백질 (ScFv-GaLV Env GP) 키메릭 리간드의 발현=49,50,2

5. ScFv-GaLV Env GP chimeric ligand가 display된 레트로바이러스의 감염효율=50,51,5

6. 인체 암표적성 humanized single-chain antibody 생산 바이러스 포장 세포주의 개발=55,56,1

7. Viral titration=55,56,2

8. 증식성 레트로바이러스(RCR)의 검출 기술 확립=56,57,1

9. 개발된 면역 레트로좀의 인체 암세포 특이적 유전자 전달 및 발현 검증=56,57,2

10. 레트로 바이러스를 이용한 치료용 유전 도입을 위한 면역레트로좀 설계 시 liposome과 Polybrene의 효율성 비교=57,58,2

11. 암 전이 동물 모델의 구축=59,60,2

12. 암 전이 동물모델에서 표적 암세포 특이적인 유전자 전달효율=60,61,3

13. ScFv-GaLV Env GP 키메릭 리간드를 이용한 암의 전이 억제=63,64,2

제3장. 결론=65,66,8

영문목차

[title page etc.]=0,1,2

Summary (in Korea)=2,3,4

Summary (in English)=6,7,1

Contents (in English)=7,8,5

Contents (in Korea)=12,13,4

I. Introduction=16,17,4

II-1. Material and Methods=20,21,1

1. Construction of retrovirus gag-pol (env-) expressing packaging cell lines=20,21,1

2. Development of humanized single-chain antibody producing phagemid vector=20,21,3

3. Developments of anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands expressing recombinant retroviral vector=22,23,1

A. Structural and functional analyses of GaLV envelope glycoprotein=22,23,3

B. Construction of anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands expressing recombinant retroviral vector=24,25,3

4. Western blotting analysis of anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands=26,27,2

5. Analysis of transduction efficiency using recombinant retroviruses displaying anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands=27,28,2

6. Construction of the anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env expressing packaging cell lines=28,29,1

7. Viral titration=28,29,2

8. Establishment of RCR detection methods=29,30,2

9. Targeted transduction of recombinant retrovirus displaying anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands=30,31,2

10. Comparison of transduction efficiency by polybrene and lipofectamine=31,32,1

11. Pulmonary metastasis by systemic intravenous injection=31,32,2

12. Analysis of in vivo transduction=32,33,2

13. Effect of TIMP-2 expressing retroviral vector displaying ScFv-GaLV Env chimeric ligands on pulmonary metastasis=33,34,2

II-2. Results and Application=34,35,1

1. Construction of retrovirus gag-pol (env-) expressing packaging cell lines=34,35,1

2. Development of humanized single-chain antibody producing phagemid vector=34,35,4

3. Developments of anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands expressing recombinant retroviral vector=37,38,1

A. Structural and functional analyses of GaLV envelope glycoprotein=37,38,9

B. Construction of anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands expressing recombinant retroviral vector=45,46,5

4. Production of recombinant retroviruses anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands=49,50,2

5. Transduction efficiency of recombinant retroviruses displaying anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands=50,51,5

6. Construction of the anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env expressing packaging cell lines=55,56,1

7. Viral titration=55,56,2

8. Establishment of RCR detection methods=56,57,1

9. Targeted transduction of recombinant retrovirus displaying anti-TAG-72 ScFv-GaLV Env chimeric ligands=56,57,2

10. Comparison of transduction efficiency by polybrene and lipofectamine=57,58,2

11. Construction of mouse pulmonary metastasis model=59,60,2

12. Analysis of transduction efficiency of recombinant retrovirus vector displaying ScFv-GaLV Env chimeric ligands=60,61,3

13. Inhibitory effect by TIMP-2 expressing retroviral vector displaying ScFv-GaLV Env chimeric ligands on pulmonary metastasis=63,64,2

III. CONCLUSION=65,66,8

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