목차

표제지=0,1,1

최종보고서/신동훈=0,2,1

제출문=1,3,1

요약문=2,4,3

SUMMARY=5,7,4

CONTENTS=9,11,7

목차=16,18,6

제1장 연구 개발 과제의 개요=22,24,1

제1절 연구 개발 과제의 목적과 범위=22,24,1

제2절 연구 개발의 필요성=22,24,4

제2장 국내ㆍ외 기술 개발의 현황=26,28,2

제3장 연구 개발 및 결과=28,30,1

제1절 뇌기능 신경 전달물질 분해 효소 저해 미량소재의 실용화=28,30,1

1. 서설=28,30,2

2. 재료 및 방법=29,31,1

가. 재료=29,31,1

나. 실험 방법=29,31,1

1) Acetylcholinesterase 저해 물질의 검색 시료 제조=29,31,2

2) Acetylcholinesterase 저해 효과 측정=30,32,2

3) 유자로 부터의 acetlycholinesterase 저해 물질의 정제=31,33,2

4) Acetlycholinesterase 저해 물질의 in vivo 상의 독성실험=32,34,1

5) Acetlycholinesterase 저해 물질의 in vivo 상의 인지능력 검사=32,34,2

3.결과=33,35,1

가. 식ㆍ약용 식물소재로 부터의 acetylcholinesterease 저해활성 검색=33,35,1

1) Acetylcholinesterase 저해 활성 성분 검색 assay 계 확립=33,35,1

2) Acetylcholinesterase 저해 물질의 검색=33,35,6

나. 선정된 acetylcholinesterase 저해 물질의 in vivo 상의 독성실험=39,41,2

다. 선정된 acstylcholinesterase 저해 물질의 in vivo 상의 인지력 실험=40,42,1

1) Y-maze test=40,42,2

2) Passive avoidance test=41,43,2

라. 선정된 acetylcholinesterase 저해 물질의 정제=42,44,1

1) 유자에서의 저해 활성 물질의 탐색을 위한 1차 물질 분리=42,44,2

2) First silical-gel column chromatograpy에 의한 유자 methanol 추출물의 AChE에 대한 억제 활성=43,45,2

3) Second silical-gel column chromatograpy에 의한 유자 methanol 추출물의 AChE에 대한 억제 활성=44,46,2

4) HPLC에 의한 유자 metanol 추출물의 저해 활성물질 분리=45,47,2

제2절 뇌기능 신경전달 물질 합성효소 활성화 미량소재의 실용화=47,49,1

1. 서설=47,49,2

2. 재료 및 실험 방법=48,50,1

가. 재료=48,50,1

나. 실험 방법=48,50,1

1) Choline acetyltransferase 활성 물질의 검색시료 제조=48,50,2

2) Choline acetyltransferase 활성 효과 측정=49,51,2

3) 대추로부터의 choline acetyltransferase 활성 물질의 정제=50,52,2

4) Choline acetyltransferase 활성 물질의 in viuo 상의 독성실험=51,53,1

5) Choline acetyltransferase 활성 물질의 in viuo 상의 인지능력 검사=52,54,1

3.결과=52,54,1

가. 식ㆍ약용 생물자원으로부터의 choline acetyltransferase 활성 검색=52,54,1

1) Choline acetyltransferase 활성 성분 검색 assay 계 확림=52,54,1

2) Choline acetyltranxferase 활성 물질의 검색 및 선정=52,54,9

나. 선정된 choline acetlytransferase 활성 물질의 in vivo 상의 독성실험=60,62,2

다. 선정된 choline acetyltransferase 활성 물질의 in vivo 상의 인지력 실험=61,63,1

1) Y-maze test=61,63,2

2) Passive avoidance test=62,64,2

라. 선정된 choline acetyltransferase 활성 물질의 정제=63,65,1

1) 대추에서의 저해 활성 물질의 탐색을 위한 1차 물질 분리=63,65,2

2) Silical-gel column chromatograpy에 의한 대추 methanol 추출물의 ChAT 활성=64,66,2

3) HPLC에 의한 대추 methanol 추출물의 활성물질 분리=66,68,1

제3절 외인성 피부노화 제어 미량 소재의 실용화=67,69,1

1. 서설=67,69,3

2. 재료 및 방법=69,71,1

가. 재료=69,71,2

나. 실험 방법=71,73,1

1) MMP-1 억제 활성물질 검색용 시료의 제조=71,73,1

2) MMP-1 및 MMP-2 억제 활성 assay 계=71,73,2

3) Cell viability 측정=72,74,1

4) 선정 시료 두충의 메탄을 추출 및 유기용매 분획=72,74,1

5) 선정 시료의 항산화 활성 검토=72,74,1

6) MMP-1 억제 활성 물질의 in vivo 독성 실험=72,74,2

7) 두충으로부터 MMP-1 억제 활성 물질의 분리 및 구조 동정=73,75,2

3. 결과=74,76,1

가. 식ㆍ약용 식물로부터 MMP-1 억제활성물질의 검색=74,76,1

1) 식ㆍ약용 식물호부터 MMP-1 억제활성물질의 1차 검색=74,76,1

2) MMP-1 억제 활성 물질의 2차 검색=74,76,2

3) 선정된 두충 methanol 추출물의 in vivo 독성 실험=75,77,7

나. 두충 함유 MMP-1 억제 활성 물질의 정제 및 구조 동정=82,84,1

1) 두충의 methanol 추출 및 유기용매 분획=82,84,2

2) Silica gel 60 open column chromatigraphy=83,85,1

3) Prep-TLC=83,85,1

4) HPLC=84,86,1

5) 정제 물질의 구조 조정[원본불량;p.86~87]=84,86,5

다. 두충으로부터 분리된 acubindml 생리학적 특성=88,90,1

1) Aucubin의 cytotoxicity=88,90,1

2) Aucubin의 항산화 활성=88,90,2

3) MMP-1의 억제 활성=89,91,1

4) MMP-2의 억제 활성=89,91,5

제4절 비만,당뇨 예방용 glucose uptake 조절 미량 소재의 실용화=94,96,1

1. 서설=94,96,3

2. 재료 및 방법=96,98,1

가. 재료=96,98,1

나. 방법=96,98,1

1) Glucose uptake 저해 활성 물질의 검색 시료의 조제=96,98,2

2) Glucose uptake 저해 활성 assay 계=98,100,1

3) Glucose uptake 저해 활성 물질의 in vlvo 독성 실험=98,100,1

4) In vivo 에서의 glucose uptake 저해 활성=98,100,3

5) 선정시료 석류의 methanol 추출 및 유기용매 분획=101,103,1

6) 석류로부터 glucose uptake 저해 활성물질의 분리 및 정제=102,104,1

7) 석류 함유 glucose uptake 저해 활성 물질의 구조 분석=102,104,1

3.결과=102,104,1

가. 식ㆍ약용 식물로부터 glucose uptake 저해활성물질의 검색=102,104,1

1) 식ㆍ약용 식물로부터 glucose uptake 저해활성물질의 1차 검색=102,104,5

2) Glucose uptake 저해 활성 시료의 2차 검색=107,109,3

3) In vivo에서의 glucose uptake 저해 활성=109,111,4

4) 선정된 석류 methanol 추출물의 in vivo 급성 독성=112,114,2

나. 석류함유 glucose uptake 저해 활성물질의 정제=113,115,1

1) 석류의 methanol 추출 및 유기 용매 분획=113,115,2

2) 1차 silica gel 60 open column chromatography=114,116,1

3) 2차 silica gel 60 open column chromatography=115,117,1

4) Prep-Thin layer chromatography=115,117,1

5) HPLC=115,117,1

다. 정제 물질 PG-1의 구조 해석=115,117,7

라. 석류로부터 분리된 PG-la의 glucose uptake 저해 활성=122,124,1

제5절 식ㆍ약용 생물 자원 함유 미량 소재의 실용화=123,125,1

1. 서설=123,125,2

2. 선정 시료들로부터 생리 활성 물질 추출 조건의 최적화 및 공업적 수준의 정제 방법 확립=124,126,1

가. 유자로부터 acetylcholinesterase inhibitor 물질의 공업적 추출 및 정제=124,126,3

나. 대추로부터 choline acetyltransferase 활성 물질의 공업적 추출 및 정제=127,129,2

다. 두충으로부터 MMP-1 억제활성성분의 추출 및 공업적 추출 및 정제=129,131,6

라. 석류로부터 glucose uptake 저해 활성 물질의 공업적 추출 및 정제=135,137,6

제6절 식ㆍ약용 함유 생리활성 물질의 기능상 식품화=141,143,1

1. 재료 및 방법=141,143,1

가. 드링크제 제작=141,143,1

나. 연질 캡슬 제작=141,143,1

다. 과립제 제작=141,143,1

2. 결과=141,143,1

가. 드링크제 제작=141,143,2

나. 연질 캡슬 제작=143,145,1

다. 과립제 제작=144,146,1

라. 제품의 외관 및 안정성 검사=145,147,3

제4장 목표달성도 및 관련분야 기여도=148,150,1

제1절 연구개발 목표 및 달성도=148,150,5

제2절 관련분야에의 기여도=153,155,1

제5장 연구개발 결과 활용계획=154,156,1

제6장 연구개발 과정에서 수집한 해외 과학 기술 정보=155,157,2

제7장 참고 문헌=157,159,4

부록=161,163,1

학회 발표 및 논문 발표=161,163,21

특허 출원=182,184,27

영문목차

[title page etc.]=0,1,3

Summary (Korean)=2,4,3

Summary (English)=5,7,4

CONTENTS=9,11,7

Contents (Korean)=16,18,6

Part 1. The Outline for Research and Development=22,24,1

Chapter 1. The Purpose and Limit for Research and Development=22,24,1

Chapter 2. The Need of Research and Development=22,24,4

Part 2. The Present Condition of Technical development=26,28,2

Part 3. Results and research development=28,30,1

Chapter l. Practical Utilization of Acetylcholinesterase inhibitor from Micro-material=28,30,1

1. Introduction=28,30,2

2. Materials and Methods=29,31,1

A. Samples and Reagents=29,31,1

B. Experimental Approach=29,31,1

a. Sample preparation for screening of acetylcholinesterase inhibition substance=29,31,2

b. In vitro measurement of acetylcholinesterase inhibition=30,32,2

c. Purification and characterization of acetylcholinesterase inhibitor from Citrus junos=31,33,2

d. In vivo toxicity test of acetlycholinesterase inhibitor=32,34,1

e. In vivo ability of learning and memory test of acetylcholinesterase inhibitor=32,34,2

3. Results and Discussion=33,35,1

A. Screening of acetylcholinesterase inhibition substance from natural edible plants=33,35,1

a. Establishment of acetlycholinesterase assay for inhibitor screening from natural edible plants=33,35,1

b. Screening of acetylcholinesterase inhibitor=33,35,6

B. Toxicity of acetlycholinesterase inhibitor in vivo=39,41,2

C. Learning and memory test in vivo=40,42,1

a. Y-maze test=40,42,2

b. Passive avoidance test=41,43,2

D. Purification and characterization of acetylcholinesterase inhibitor=42,44,1

a. Separation of acetylcholinesterase inhibitor from Citrus junos=42,44,2

b. Search of effect of acetylcholinesterase inhibitor from Citrus junos in the first silica-gel column chromatography=43,45,2

c. Search of effect of acetylcholinesterase inhibitor from Citrus junos in the second silica-gel column chromatography=44,46,2

d. Separation of acetylchoinesterase inhibitor from Citrus junos=45,47,2

Chapter 2. Practical Utilization of Cholin acetyltransferase Activator from Micro-material=47,49,1

1. Introduction=47,49,2

2. Materials and Methods=48,50,1

A. Samples and Reagents=48,50,1

B. Experimental Approach=48,50,1

a. Sample preparation for screening of choline acetyltransferase activator=48,50,2

b. Purification and characterization of choline acetyltransferase activator from Zizyphus jujuba=49,51,2

c. Purification and characterization of choline acetyltransferase activator from Zizyphus jujuba=50,52,2

d. In vivo Toxicity test of choline acetyltransferase activator=51,53,1

e. In vivo ability of learning and Memory test of choline acetyltransferase activator=52,54,1

3. Results and Discussions=52,54,1

A. Screening of choline acetyltransferase activation substance from natural edible plants=52,54,1

a. Establishment of choline acetyltransferase assay for inhibitor screening from natural edible plants=52,54,1

b. Screening of cholin acetyltransferase activator=52,54,9

B. In vivo toxicity of choline acrtyltransferase=60,62,2

C. In vivo learning and memory test=61,63,1

a. Y-maze test=61,63,2

b. Passive avoidance test=62,64,2

D. Purification and characterization of choline acetyltransferase activator=63,65,1

a. Separation of choline acetyltransferase activator from zizyphus jujuba=63,65,2

b. Search of effect of choline acetyltransferase activator from Zizyphus. jujuba in silica-gel column chromatography=64,66,2

c. Separation of choline acetyltransferase activator from Zizyphus. jujuba=66,68,1

Chapter 3. Utilization of MMP-1 inhibitor from Eucommia ulmoides=67,69,1

1. Introduction=67,69,3

2. Materials and Methods=69,71,1

A. Samples and Reagents=69,71,2

B. Experimental Approach=71,73,1

a. Sample preparation=71,73,1

b. Determination of MMP-1 and MMP-2 inhibitory activities in vitro=71,73,2

c. Measurement of Cell viability=72,74,1

d. Preparation of Eucommia ulmoides=72,74,1

e. Measurement of Antioxidative effects=72,74,1

f. Acute toxicity of Eucommia ulmoides in vivo=72,74,2

g. Isolation and Purification of MMP-1 inhibitor from Eucommia ulmoides=73,75,2

3. Results and Discussions=74,76,1

A. Screening of MMP-1 inhibitor from edible plants=74,76,1

a. First screening of MMP-1 inhibitor from edible plants=74,76,1

b. Second screening of MMP-1 inhibitor from edible plants=74,76,2

c. Acute toxicity of Eucommia ulmoides in vivo=75,77,7

B. Isolation and Purification of MMP-1 inhibitor from Eucommia ulmoides=82,84,1

a. Extraction and separation of Eucommia ulmoides=82,84,2

b. Silica gel 60 open column chromatography=83,85,1

c. Prep-TLC=83,85,1

d. HPLC=84,86,1

e. Purification and characterization of MMP-1 inhibitor=84,86,5

C. Physiological property of aucubin from Eucommia ulmoides[원본불량;p.86~87]=88,90,1

a. Cytotoxicity of aucubin=88,90,1

b. Antioxidaive effect of aucubin=88,90,2

c. Inhibitory activity of MMP-1=89,91,1

d. Inhibitory activity of MMP-1=89,91,5

Chapter 4. Utilization of intestinal glucose uptake inhibitor from Punica granatum=94,96,1

1. Introduction=94,96,3

2. Materials and Methods=96,98,1

A. Samples and Reagents=96,98,1

B. Experimental Approach=96,98,1

a. Sample preparation=96,98,2

b. Determination of intestinal glucose uptake and transport assay system=98,100,1

c. Acute toxicity of Punica granatum in vivo=98,100,1

d. Glucose uptake inhibitory activity of Punica granatum in vivo=98,100,3

e. Preparation of Punica granatum=101,103,1

f. Isolation and Purification of glucose uptake inhibitor from Punica granatum=102,104,1

g. Structure analysis of glucose uptake inhibitor from Punica granatum=102,104,1

3. Results and Discussion=102,104,1

A. Screening and selection of glucose uptake inhibitor from edible plants=102,104,1

a. Frist screening of glucose uptake inhibitor from edible plants=102,104,5

b. Second screening of glucose uptake inhibitor from edible plants=107,109,3

c. Glucose uptake inhibitory activity of Punica granatum in vivo=109,111,4

d. Acute toxicity of Punica granatum in vivo=112,114,2

B. Isolation and Purification of glucose uptaker inhibitor from Punica granatum=113,115,1

a. Extraction and separation of Punica granatum=113,115,2

b. First silica gel 60 open column chromatography=114,116,1

c. Second silica gel 60 open column chromatography=115,117,1

d. Prep- Thin layer chromatography=115,117,1

e. HPLC=115,117,1

C. Structure analysis of purified PG-la=115,117,7

D. Glucose uptake inhibitory activity of PG-la from Punica granatum=122,124,1

Chapter 5. Development of micro-material from natural edible plants as functional foods=123,125,1

1. Introduction=123,125,2

2. Optimization of extracting conditions in the industrial point=124,126,1

A. Extraction and purification procedures of acetylcholinesterase inhibitor from Citus junos for industrial use=124,126,3

B. Extraction and purification procedures of choline acetyltransferase activator from Zizyphus jujuba for industrial use=127,129,2

C. Extraction and purification procedures of MMP-1 inhibitor from Eucommia ulmoides for industrial use=129,131,6

D. Extraction and purification procedures of glucose uptake from Punica granatum for industrial use=135,137,6

Chapter 6. Development of bio-reactives from natural edible plants as the functional foods=141,143,1

1. Materials and Methods=141,143,1

A. Production of beverage=141,143,1

B. Production of capsule=141,143,1

C. Production of granule=141,143,1

2. Results=141,143,1

A. Production of beverage=141,143,2

B. Production of capsule=143,145,1

C. Production of granule=144,146,1

D. Appearance of end-product and contamination of microorganism=145,147,3

Part 4. Achievements of purpose and rest of relative field=148,150,1

Chapter 1. Purpose of research and development and achievement=148,150,5

Chapter 2. The rest of relative field=153,155,1

Part 5. Results of research and development and applicative plan=154,156,3

Part 7. References=157,159,4

APPENDIX=161,163,1

Publications=161,163,21

Patents=182,184,27