목차

표제지=0,1,1

제출문=1,2,1

요약문=2,3,2

SUMMARY=4,5,1

CONTENTS=5,6,4

목차=9,10,4

List of Tables=13,14,2

List of Figures=15,16,3

제1장 연구개발과제의 개요=18,19,1

1절 연구개발의 목적 및 필요성=18,19,1

1. 기술적 측면=18,19,3

2. 경제 산업적 측면=20,21,1

3. 사회 문화적 측면=20,21,2

2절 연구 개발의 범위=21,22,2

제2장 국내외 기술개발 현황=23,24,1

1절 국내의 관련분야에 대한 기술 개발 현황=23,24,1

2절 연구 결과가 국내외 기술 개발 현황에서 차지하는 위치=24,25,3

제3장 연구 개발수행 내용 및 결과=27,28,1

1절 칼슘 결합 인산화 펩타이드의 제조=27,28,1

1. 실험적 접근 방법 및 연구내용=27,28,1

가. 원료 단백질의 분리 정제=27,28,2

나. 분리 대두 단백(ISP) 용액의 용해도를 높이기 위한 최적 조건 확립=28,29,5

다. 가수분해 효소를 이용한 인산화 대두 펩타이드(SPP) 생산=32,33,5

라. 대두 단백질의 인산화=36,37,5

마. 칼슘 결합 반응의 조건 확립=40,41,3

바. Affinity chromatography를 이용한 proglycinin 유래의 phosphopeptide의 분리=42,43,3

사. 우수칼슘결합성 대두 펩타이드의 대량 확보=44,45,2

2. 연구결과=45,46,1

가. 원료 단백질의 분리 정제=45,46,1

나. ISP 용액의 용해도를 높이기 위한 최적 조건 확립=45,46,4

다. 가수분해 효소를 이용한 인산화 대두 펩타이드(SPP)의 생산=48,49,24

라. 대두 단백질의 인산화=71,72,12

마. 칼슘 결합 반응의 조건 확립=83,84,13

바. IMAC를 이용한 proglycinin 유래의 phosphopeptide의 분리=95,96,1

1) phosphopeptide의 분리=95,96,4

2) proglycinin phosphopeptide의 칼슘 결합능 측정=98,99,8

2절 인산화 펩타이드의 인산칼슘 침전 저해=106,107,1

1. 실험적 접근 방법 및 연구내용=106,107,2

2. 연구 결과=107,108,1

가. 인산화 펩타이드의 인산칼슘 침전 저해:P-Ser and P-SerSerSer vs. Ser and SerSerSer=107,108,1

나. 인산화 펩타이드의 인산칼슘 침전 저해:P-13 amino acids vs. 13 amino acids=107,108,11

다. 인산화 펩타이드의 인산칼슘 침전 저해:P-ISP hydrolysates vs. ISP hydrolysates=117,118,11

3절 동물 및 조직 배양에 의한 칼슘 펩타이드의 흡수도=128,129,1

1. 실험적 접근 방법 및 연구 내용=128,129,2

가. 조직배양=129,130,1

나. Plasmids=129,130,1

다. Transient transfection=129,130,2

라. Stable transfection=130,131,1

마. Cell treatment=131,132,1

바. Luciferase assay=131,132,1

2. 연구 결과=131,132,1

가. EDTA의 농도 결정=132,133,1

나. Ca-P-SerSerSer의 흡수도 측정=132,133,7

다. Ca-P-Ser의 흡수도 측정=139,140,10

제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도=149,150,1

1절 1차년도=149,150,1

1) 연구개발 목표=149,150,2

2) 연구 평가의 착안점=151,152,1

3) 연구 개발 목표의 달성도=151,152,3

4) 관련분야의 기술 발전에의 기여도=153,154,2

2절 2차년도=154,155,1

1) 연구개발 목표=154,155,2

2) 연구 평가의 착안점=156,157,1

3) 연구 개발 목표의 달성도=156,157,3

4) 관련분야의 기술 발전에의 기여도=158,159,2

3절 3차년도=159,160,1

1) 연구개발 목표=159,160,2

2) 연구 평가의 착안점=160,161,1

3) 연구 개발 목표의 달성도=160,161,4

4) 관련분야의 기술 발전에의 기여도=164,165,1

제5장 연구개발결과의 활용계획=165,166,1

1절 추가 연구의 필요성=165,166,2

2절 타 연구에의 응용=166,167,1

3절 기업화 추진 방안=166,167,3

제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보=169,170,2

제7장 참고문헌=171,172,8

영문목차

[title page etc.]=0,1,5

CONTENTS=5,6,13

Chapter 1. Outline of the report on development of research=18,19,1

I. Objects and necessities of the development of research=18,19,1

1. Technical aspects=18,19,3

2. Economic industrial aspects=20,21,1

3. Social cultural aspects=20,21,2

II. Scope of the studies=21,22,2

Chapter 2. Status of the development of techniques domestically and at overseas=23,24,1

I. Status of the development of related techniques within the country and at overseas=23,24,1

II. Position of the outcome of the research at the present status of progress=24,25,3

Chapter 3. Contents and products of the development of research=27,28,1

I. Production of calcium bound phosphopeptide=27,28,1

1. Approach of the experiment and contents of the research=27,28,1

a. Separation and purification of the protein=27,28,2

b. Establishment of the conditions for the higher solubility of isolated soybean protein(ISP)=28,29,5

c. Production of phospho-soybean peptide(SPP) using enzymatic hydrolysis=32,33,5

d. Phosphorylation of ISP=36,37,5

e. Establishment of the conditions for the calcium binding reactions=40,41,3

f. Separation of phosphopeptide from proglycinin using IMAC=42,43,3

g. Gene cloning of calcium binding peptide=44,45,2

2. Results of the studies=45,46,1

a. Separation and purification of the protein=45,46,1

b. Establishment of the conditions for the higher solubility of isolated soybean protein(ISP)=45,46,4

c. Production of soybean phospho-peptide(SPP) using enzymatic hydrolysis=48,49,24

d. Phosphorylation of ISP=71,72,12

e. Establishment of the conditions for the calcium binding reactions=83,84,13

f. Separation of phosphopeptide from proglycinin using IMAC=95,96,1

(i) separation of phosphopeptide=95,96,4

(ii) Measurement of calcium bindings to phosphopeptide from proglycinin=98,99,8

II. Inhibition of calcium phosphate precipitation by phosphopeptide=106,107,1

1. Approach of the experiment and contents of the research=106,107,2

2. Results of the research=107,108,1

a. Inhibition of calcium phosphate precipitation by phosphopeptide:P-Ser and P-SerSerSer vs. Ser and SerSerSer=107,108,1

b. Inhibition of calcium phosphate precipitation by phosphopeptide:P-13 amino acids vs. 13 amino acids=107,108,11

c. Inhibition of calcium phosphate precipitation by phosphopeptide:P-ISP hydrolysates vs. ISP hydrolysates=117,118,11

III. Absorption of the calcium peptide=128,129,1

1. Approach of the experiment and contents of the research=128,129,2

a. Tissue culture=129,130,1

b. Plasmids=129,130,1

c. Transient transfection=129,130,2

d. Stable transfection=130,131,1

e. Cell treatment=131,132,1

f. Luciferase assay=131,132,1

2. Result of the research=131,132,1

a. Determination for concentration of EDTA=132,133,1

b. Absorption of Ca-P-SerSerSer=132,133,7

c. Absorption of Ca-P-Ser=139,140,10

Chapter 4. Achievements and contributions of the studies to the related fields=149,150,1

I. The first year of the study=149,150,1

1. Goal of the study=149,150,2

2. Standpoints of evaluation=151,152,1

3. Accomplishment of the studies=151,152,3

4. Contributions to technical development in related areas=153,154,2

II. The second year of the study=154,155,1

1. Goal of the study=154,155,2

2. Standpoints of evaluation=156,157,1

3. Accomplishment of the studies=156,157,3

4. Contributions to technical development in related areas=158,159,2

III. The third year of the study=159,160,1

1. Goal of the study=159,160,2

2. Standpoints of evaluation=160,161,1

3. Accomplishment of the studies=160,161,4

4. Contributions to technical development in related areas=164,165,1

Chapter 5. Plans for the application of the research=165,166,1

I. Necessities for further studies=165,166,2

II. Applications to other studies=166,167,1

III. Plans for industrialization=166,167,3

Chapter 6. Informations on scientific techniques at overseas=169,170,2

Chapter 7. Reference=171,172,8

1. FPLC operating conditions=43,44,1

2. Purification of proglycinin from E.coli JM105 (A1aB1b)=47,48,1

3. ISP농도에 따른 단백질의 용해도=49,50,1

4. 용해도 시간에 따른 단백질의 용해도=51,52,1

5. pH에 따른 단백질의 용해도=53,54,1

6. 가수분해와 인산화 반응 실험 과정=61,62,1

7. 대두 단백 가수 분해물과 인산화 대두 단백 가수분해물의 칼슘 결합능 비교 (실험 1의 경우)=62,63,1

8. 대두 단백 가수 분해물과 인산화 대두 단백 가수분해물의 칼슘 결합능 비교 (실험 2의 경우)=63,64,1

9. 대두 단백 가수 분해물의 수율 (실험 1의 경우)=64,65,1

10. 대두 단백 가수 분해물의 수율 (실험 2의 경우)=65,66,1

11. Concentration of phosphorus in total sample (ppm)=67,68,1

12. Sample별 인 함량=68,69,1

13. Sample별 단백질함량과 인 함량=69,70,1

14. Sample별 단백질함량과 칼슘 및 인 함량=70,71,1

15. 인산화제에 따른 칼슘 결합능의 비교=72,73,1

16. 합성펩타이드의 칼슘 결합도 측정=104,105,1

17. The inhibition of calcium phosphate precipitation (Ser)=108,109,1

18. The inhibition of calcium phosphate precipitation (P-Ser)=110,111,1

19. The inhibition of calcium phosphate precipitation (SSS)=112,113,1

20. The inhibition of calcium phosphate precipitation (P-SSS)=114,115,1

21. The inhibition of calcium phosphate precipitation (13 amino acids)=118,119,1

22. The inhibition of calcium phosphate precipitation (P-13 amino acids)=120,121,1

23. The inhibition of calcium phosphate precipitation (ISP hydrolysate)=123,124,1

24. The inhibition of calcium phosphate precipitation (P-ISP hydrolysate)=125,126,1

25. EDTA 농도(0mM-0.6mM)에 따른 칼슘의 Chelating=133,134,1

26. EDTA 농도(0mM-2mM)에 따른 칼슘의 Chelating=135,136,1

27. Expression of calcium dependent calmodulin-luciferase in response to extracellular concentration of P-Ser-Ser-Ser-Ca=137,138,1

28. Expression of calmodulin-luciferase in response to extracellular concentration of P-Ser-Ca=140,141,1

29. Expression of calmodulin-luciferase by the amount of P-Ser-Ca uptaken through cellular membrane (Caco-2 cells)=142,143,1

30. Expression of calmodulin-luciferase by the amount of P-Ser-Ca uptaken through cellular membrane (HEK 293T cells)=144,145,1

31. Expression of calmodulin-luciferase by the amount of P-Ser-Ca uptaken through cellular peptide transporter=146,147,1