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목차

표제지=0,1,1

제출문=1,2,2

요약문=3,4,8

SUMMARY=11,12,8

CONTENTS=19,20,6

목차=25,26,6

제1장 Cordyceps sinensis 균사체 배양 및 가공식품 개발[원본불량;p.31]=31,32,1

제1절 서론=31,32,2

제2절 재료 및 방법=33,34,1

1. 균주=33,34,1

2. 배지 및 배양조건=33,34,3

3. 분석방법=35,36,3

제3절 결과 및 고찰=38,39,1

1. 자료의 수집과 정리 및 균주 확보=38,39,1

2. 최적 성장조건 규명=38,39,11

3. 최적 배지 조성=49,50,31

4. 회분 배양=79,80,19

5. 회분 배양의 응용=97,98,5

6. 유가식 배양=101,102,1

가. pH Stat 방법의 적용=101,102,9

나. 일정비율 공급방법(Constant Feeding Strategy)=109,110,9

제4절 Cordyceps sinensis 균사체를 이용한 가공식품 개발=118,119,5

제5절 참고문헌=123,124,2

제2장 P. tenuipes 액체배양을 통한 균사체 및 생리활성물질 생산공정 개발=125,126,1

제1절 서론=125,126,1

1. 배경=125,126,3

2. 배양전략=127,128,2

제2절 재료 및 방법=129,130,1

1. 실험재료=129,130,1

2. 배양조건=129,130,3

3. 분석방법=131,132,4

제3절 결과 및 고찰=135,136,1

1. P. tenuipes의 생장조건 구명=135,136,1

가. 고수율 균주 개발=135,136,1

나. 최적 성장조건 검토=135,136,5

다. 최적 배지조성 검토=139,140,15

2. 액체배양공정 개발=153,154,1

가. 목적산물생산 촉진 및 저해요인 검토=153,154,2

나. 배양조건 변화에 따른 목적산물 생산 변화 검토=155,156,9

다. 동충하초 효능 물질인 cordycepin 분석 방법 설정=164,165,15

3. 생물반응기에서 균사체 증식의 최적화=179,180,1

가. 고농도 배양공정 개발=179,180,5

나. Fed-batch culture 기술의 적용=184,185,9

다. 생산성 극대화를 위한 생산공정 개발=192,193,8

제4절 결론=200,201,2

제5절 참고문헌=202,203,5

제3장 Cordyceps militaris의 대량생산기술의 개발과 효능연구=207,208,1

제1절 C. militaris의 최적배양 조건=207,208,1

1. 서론=207,208,2

2. 재료 및 방법=208,209,1

가. 공시균주=208,209,1

나. 배지의 조제=208,209,2

다. 배양 방법=209,210,2

라. 균사체의 정량=210,211,1

3. 결과 및 고찰=210,211,1

가. 균사체의 생산=210,211,14

나. C. militaris 대량배양사의 최적조건=223,224,4

4. 적요=227,228,1

5. 참고문헌=227,228,4

Abstracts=230,231,1

제2절 C. militaris 추출물처리에 의한 생리활성물질 유도=231,232,1

1. 서론=231,232,1

2. 재료 및 방법=231,232,1

가. C. militaris 추출물 조제=231,232,2

나. 세포배양 및 실험동물=232,233,1

다. LPS와 C. militaris 추출물의 in vivo와 in vitro 처리=232,233,2

라. Total RNA의 분리=233,234,3

마. RT(Reverse transcription)-PCR=235,236,1

바. DNA sequencing과 분석=235,236,1

사. DNA Probe 제작=235,236,1

아. Northern blot hybridization=236,237,1

자. LPS와 C. militaris 추출물의 처리에 의한 IFN-γ Assay=236,237,1

차. Chromosomal DNA 분리=236,237,2

카. CAT assay를 위한 pCAT vector의 제작=237,238,3

타. 세포내도입(Transfection)과 CAT 정량=239,240,3

파. IGIF 유전자의 발현여부 확인을 위한 Immunohistochemistry=241,242,1

하. Ligation과 transformation=241,242,2

3. 결과 및 고찰=242,243,1

가. C. militaris 추출물과 LPS를 처리한 생쥐의 뇌와 간에서 IGIF와 BDNF유전자의 발현=242,243,5

나. C. militaris 추출물과 LPS를 처리한 쥐뇌의 각 부위와 신장에서 IGIF 유전자의 발현=246,247,3

다. C. militaris 추출방법에 따른 IGIF 유전자의 발현=248,249,2

라. LPS와 C. militaris 추출물을 처리한 PC12세포에서의 IGIF와 IFN-γ 유전자의 발현=249,250,4

마. IGIF와 BDNF 유전자의 클로닝 및 염기서열 분석=252,253,2

바. PC12세포에서 발현되는 IGIF와 IGIF Isoform 유전자의 클로닝 및 염기서열 분석=253,254,2

사. PC12세포에서의 IFN-γ의 활성 측정=254,255,6

아. Nothern blot analysis=259,260,3

자. Immunohistochemistry=261,262,2

차. IGIF 유전자의 promoter 부위의 cloning 및 CAT assay=262,263,4

카. BDNF 유전자의 promoter 부위의 cloning 및 CAT assay=265,266,2

타. Neurotrophic factor 유전자 발현=266,267,4

파. PC 12 세포에서 GDNF 유전자 발현유도=270,271,1

하. C. militaris의 항암효과=270,271,6

4. 적요=276,277,2

5. 참고문헌=277,278,5

Abstracts=281,282,3

제3절 C. militaris 추출물처리에 tyrosine hydroxylase의 유도=284,285,1

1. 서론=284,285,4

2. 재료 및 방법=287,288,1

가. 시료=287,288,1

나. 세포배양 및 실험동물=287,288,1

다. Total RNA의 분리=287,288,2

라. RT(Reverse Transcriptase)-PCR=288,289,1

마. Western blotting analysis=288,289,2

바. 면역조직화학적 염색=289,290,1

3. 결과 및 고찰=289,290,1

가. RT-PCR에 의 한 TH mRAN의 발현양상=289,290,5

나. Westem blotting analysis에 의한 Tyrosine Hydroxylase 단백질 수준=293,294,4

다. 면역조직화학적 염색에 의한 TH-IR neuron 형태 및 유도발현 관찰=297,298,4

4. 적요=301,302,2

5. 참고문헌=302,303,7

ABSTRACT=308,309,2

제4절 C. militaris의 혈전분해효과=310,311,2

1./2. 재료 및 방법=311,312,1

가. 단백질분해작용 및 혈전분해작용 검색=311,312,5

나. 혈전분해효소의 정제=316,317,3

2. 결과 및 고찰=318,319,1

가. 추출물의 단백질분해활성=318,319,2

나. 추출물의 혈전분해작용=320,321,1

다. 혈전분해효소의 정제=320,321,3

라. In vivo와 in vitro에서 혈전분해=322,323,4

마. 혈전분해효소의 활성화에 미치는 factor=325,326,5

3./4. 적요=330,331,1

4./5. 참고문헌=330,331,4

ABSTRACT=334,335,3

제4장 동충하초의 우량균주 개발과 대량재배=337,338,1

제1절 서론=337,338,1

제2절 동충하초의 채집과 분류=338,339,1

1. 동충하초의 채집=338,339,2

2. 본 연구에서 사용된 동충하초의 특성=339,340,6

3. 채집 (1)=345,346,2

4. 채집 (2)=346,347,7

5. 채집 (3)=352,353,2

6. 채집 (4)=353,354,2

제3절 동풍하초의 자실체 발생실험=355,356,1

1. 실험방법=355,356,2

2. 자실체 발생실험 (1)=356,357,10

3. 자실체 발생실험 (2)=366,367,10

4. 자실체 발생실험 (3)=376,377,9

5. 자실체 발생실험 (4)=385,386,9

제4절 선발균주=394,395,1

1. 선발균주 (1)=394,395,1

2. 선발균주 (2)=394,395,2

제5절 동충하초의 비교실험=396,397,1

1. 밀폐형과 개방형의 비교 분석실험=396,397,2

2. 결과=397,398,2

제6절 대량재배=399,400,1

1. 대량 재배의 목적=399,400,1

2. 판재배에 의한 대량재배=399,400,1

3. 실험방법=399,400,5

4. 결과=403,404,2

제7절 동충하초의 성분 분석실험=405,406,1

1. 단백질정량 및 아미노산분석=405,406,1

2. 동충하초의 성분=406,407,1

제8절 결론=407,408,1

1. 동충하초 채집=407,408,2

2. 우수균주 선발=408,409,2

3. 동충하초 비교 실험=409,410,1

4. 대량재배=409,410,2

5. 동충하초의 성분분석=410,411,1

참고문헌=411,412,1

영문목차

[title page etc.]=0,1,3

Summary in Korean=3,4,8

Summary in English=11,12,8

CONTENTS=19,20,12

Chap. 1. Batch and Fed-batch Culture of Cordyceps sinensis and Development of processed foods using its mycelium and culture broth[원본불량;p.31]=31,32,1

1. Introduction=31,32,2

2. Materials and Methods=33,34,1

1. Cell line=33,34,1

2. Media and Culture conditions=33,34,3

3. Analysis=35,36,3

3. Results and Discussion=38,39,1

1. Optimization of culture conditions=38,39,1

2. Optimization of medium compositions=38,39,11

3. Batch culture=49,50,31

4. Batch culture using pulsed-feeding strategy=79,80,19

5. Fed-batch culture=97,98,21

4. Development of processed foods=118,119,5

5. References=123,124,2

Chap. 2. Process Development for Mycelium,Polysaccharide and Cordycepin Production by Liquid Cultivation of Paecilomyces tenuipes=125,126,1

1. Introduction=125,126,4

2. Materials and Methods=129,130,1

2.1. Experimental materials=129,130,1

2.2. Culture conditions=129,130,3

2.3. Analysis=131,132,4

3. Results and Discussion=135,136,1

3.1. Inquiry of growth conditions in Paecilomyces tenuipes=135,136,19

3.2. Process development for liquid cultivation=153,154,26

3.3. Optimization of cell growth using bioreactor=179,180,21

4. Conclusions=200,201,2

5. References=202,203,5

Chap. 3.=207,208,1

Section 1. The optimal cultivation of Cordyceps militaris=207,208,1

1. Introduction=207,208,2

2. Materials and Methods=208,209,1

1. Cell line=208,209,1

2. Media and Culture conditions=208,209,3

3. Result and Discussion=210,211,1

1. Production of mycelium=210,211,14

2. Optimal condition for large scale production of C. militaris=223,224,4

4. References=227,228,1

5. Summary=227,228,4

Section 2. Induction of physiological activating material by C. militaris=231,232,1

1. Introduction=231,232,1

2. Materials and Methods=231,232,1

2.1. Crude extract from C. militaris=231,232,2

2.2. Cultivation of animal cell line and experimental animals=232,233,1

2.3. Treatment of LPS and crude extract in vivo and in vitro=232,233,2

2.4. Isolation of total RNA=233,234,3

2.5. Reverse transcriptase(RT)-PCR=235,236,1

2.6. DNA sequencing and analysis=235,236,1

2.7. Production of DNA probe=235,236,1

2.8. Northern blot hybridization=236,237,1

2.9. INF-ν assay by treated LPS and C. militaris extract=236,237,1

2.10. Isolation of chromosomal DNA=236,237,6

2.11. Immunohistochemistry for the expression and identification of IGIF gene=241,242,1

2.12. Ligation and transformation=241,242,2

3. Results and Discussion=242,243,1

3.1. The expression of IGIF and BDNF gene from mouse's brain and liver treating C. militaris extract and LPS=242,243,5

3.2. The expression of the IGIF gene from mouse's kidney and each part of mouse brain treating C. militaris extract and LPS=246,247,3

3.3. The expression of IGIF gene by the treatment of water and ethanol extracts=248,249,2

3.4. The expression of IGIF and IFN-ν gene by treatment of LPS and C. militaris extracts in PC12 cell line.=249,250,4

3.5. The cloning and sequencing analysis of IGIF and BDNF gene=252,253,2

3.6. The cloning and sequencing analysis of expressed IGIF and IGIF isoform in PC12 cell line.=253,254,2

3.7. The active measurement of INF-ν in PC12 cell line=254,255,6

3.8. Nothern blotting analysis=259,260,3

3.8. Immunohoistochemistry=261,262,2

3.9. Promoter research and CAT assay of IGIF gene=262,263,4

3.10. Promoter research and CAT assay of BDNF gene=265,266,2

3.11. Gene expression of neurotrophic factors=266,267,4

3.12. Induction of GDNF gene in PC12 cell line=270,271,1

3.12. Anti-cancer activity of C. militaris=270,271,6

4. Summary=276,277,2

5. References=277,278,7

Section 3. The induction of tyrosine hydroxylase treated by C. militaris extract=284,285,1

1. Introduction=284,285,4

2. Materials and Methods=287,288,1

2.1. Samples=287,288,1

2.2. The cultivation of animal cell line and experimental animals=287,288,1

2.3. Isolation of total RNA=287,288,2

2.4. Reverse transcriptase(RT)-PCR=288,289,1

2.5. Western blotting assay=288,289,2

2.7. Immunohistochemistry=289,290,1

3. Results and Discussion=289,290,1

3.1. Induction of TH mRNA treated by C. militaris extract using RT-PCR=289,290,5

3.2. The level of TH protein treated by C. militaris extract using western blotting=293,294,4

3.3. Observation of TH-IR neuron treated by C. militaris extract using immunohistochemistry=297,298,4

4. Summary=301,302,2

5. References=302,303,8

Section 4. The effect of fibrinolysis by C. militaris=310,311,1

1. Introduction=310,311,2

2. Materials and Methods=311,312,1

2.1. The screening of proteolytic and fibrinolysis activity=311,312,5

2.2. The purification of fibrinolytic enzyme from C. militaris=316,317,3

3./2 Results and Discussion=318,319,1

3.1. Proteolytic activity of C. militaris extract=318,319,2

3.2. Fibrinolytic activity of C. militaris extract=320,321,1

3.3. The purification of fibrinolytic enzyme=320,321,3

3.4. The effects of fibrinolysis in vivo and in vitro=322,323,4

3.5. The effects of cofactors=325,326,5

4. Summary=330,331,1

5. References=330,331,7

Chap. 4. Selection of Excellent Strains of Cordyceps and Mass Culture=337,338,1

1. Introduction=337,338,1

2. Collection and Classification of Coryceps=338,339,1

1. Collection of Cordyceps=338,339,2

2. Chacteristics of Cordyceps=339,340,6

3. Collection (1)=345,346,2

4. Collection (2)=346,347,7

5. Collection (3)=352,353,3

3. Experiment of Fruiting Body in Cordyceps=355,356,1

1. Methods=355,356,2

2. Experiment of Fruiting Body (1)=356,357,10

3. Experiment of Fruiting Body (2)=366,367,10

4. Experiment of Fruiting Body (3)=376,377,9

5. Experiment of Fruiting Body (4)=385,386,9

4. Sele selection strains=394,395,1

1. Selection (1)=394,395,1

2. Selection (2)=394,395,2

5. Comparative Experiment of Cordyceps=396,397,1

1. Comparative Experiment of Close form and Open form=396,397,2

2. Results=397,398,2

6. Mass Culture=399,400,1

1. Purpose=399,400,1

2. Mass culture by plate=399,400,1

3. Methods=399,400,5

4. Results=403,404,2

7. Compounds=405,406,1

1. Analysis of Protein and Amino acid=405,406,1

2. Compounds=406,407,1

8. Results=407,408,1

1. Collection of Cordyceps=407,408,2

2. Excellent Strains=408,409,2

3. Comparative Experiment=409,410,1

4. Mass Culture=409,410,2

5. Compounds of Cordyceps=410,411,1

References=411,412,1

칼라목차

jpg

Fig 1. Photograph of 5 L Jar-Fermentor used for C. sinensis.=34,35,1

Fig 53. Mycelial growth of C. sinensis in a jar fermentor(5 L).=117,118,1

Fig 62. Photograph of wall growth on fermentation=186,187,1

Fig 70. Photograph of fruiting body at the 8th day after inoculation=195,196,1

Fig 71. Photograph of fruiting body at the 12th day after inoculation=196,197,1

Fig 72. Photograph of fruiting body at the 20th day after inoculation=197,198,1

Fig 73. Photograph of fruiting body at the 33th day after inoculation=198,199,1

Fig 1. The pathway of thrombosis and fibrinolysis=314,315,1

Note A:Secondary spores,B,Head of asci C,Hyphae D,Perithecium=348,349,3

방망이동충하초,홍두깨동충하초=354,355,1

눈꽃동충하초,동충하초,매미동충하초,칸자스동충하초=365,366,1

Cordyceps militaris,Isaria japonica,I. japonica,C. grocilioides=374,375,2

동충하초,쐐기내광 동충하초,쐐기동충하초 균사배양,눈꽃동충하초,중국산동충하초=384,385,1

Cordyceps militaris=7072,Cordyceps militaris=7209,Cordyceps sp=7110,Isaria japonica=7109,Isaria sp=7211=393,394,1

눈꽃 동충하초(개방형),눈꽃 동충하초(폐쇄형),매미동충하초 광도 400 Lux,매미동충하초 광도 100 Lux=398,399,1

Cordyceps8194,Isaria8204=404,405,1