목차

표제지=0,1,1

제출문=1,2,2

요약문=3,4,12

SUMMARY=15,16,12

CONTENTS=27,28,6

목차=33,34,6

제1장 연구개발과제의 개요=39,40,1

제1절 연구개발의 목적 및 필요성=39,40,3

제2절 연구개발 내용 및 범위=41,42,3

제2장 국내외 기술개발 현황=44,45,1

제1절 국내ㆍ외 관련기술 현황=44,45,3

제2절 국내ㆍ외 관련 연구내용 및 문제점과 본 연구종료 후 기대되는 국내 기술 상황=47,48,4

제3장 고기능성 대두제품 제조를 위한 발효균주 개발=51,52,1

제1절 서론=51,52,4

제2절 재료 및 방법=55,56,1

1. 사용 재료=55,56,1

2. 배지 및 배양=56,57,1

3. 분리균에 의한 isoflavone 배당체의 분해력 측정=56,57,2

4. 분리균의 isoflavone 배당체 가수분해 효소의 활성 측정=57,58,2

5. Polymerase chain reaction (PCR)=58,59,1

6. 된장의 제조=59,60,1

7. 효소의 정제=59,60,2

8. 단백질 정량=60,61,1

9. 단백질의 전기 영동=60,61,1

10. 분자량 측정=60,61,1

제3절 균주의 분리 및 선발=61,62,1

1. 균의 분리=61,62,1

2. 균주의 선발=61,62,12

3. 선발된 균주의 동정=72,73,8

4. 선발된 균주의 보존법=79,80,3

제4절 발효조건의 검토=81,82,1

1. 선발된 균주에 의한 발효과정중 genistein 및 daidzein의 2차 분해조사=81,82,2

2. 발효에 미치는 온도의 영향=82,83,2

3. 발효에 미치는 가염 시기의 영향=84,85,3

4. 발효기간에 따른 isoflavone 배당체의 분해 정도=87,88,2

5. 발효에 미치는 최적 접종량=88,89,2

제5절 발효에 미치는 염류 및 기타 첨가제효과=89,90,1

1. 염농도가 발효에 미치는 영향=89,90,3

2. 부형제가 발효에 미치는 영향=91,92,1

3. 부형제 첨가농도의 영향=92,93,1

4. 혼합발효의 효과=93,94,2

5. 실험실 scale 배양=94,95,2

제6절 대규모의 제품을 생산하기 위한 발효 및 제품화 공정=96,97,2

제7절 Bacillus sp. K123-1 균주가 생산하는 isoflavone glucosidase의 정제=98,99,1

1. Isoflavone glucosidase 생산에 미치는 배양시간의 영향=98,99,1

2. 황산암모늄 분획침전=99,100,2

3. DEAE Sephadex A-50 ion exchange column chromatography=100,101,2

4. Sephacryl S-200 HR gel chromatography=102,103,1

5. Fast protein liquid chromatography(FPLC)=102,103,3

6. 정제 효소의 순도검정=105,106,1

7. 정제 효소의 분자량 측정=106,107,1

제8절 정제된 isoflavone glucosidase의 효소학적 성질=107,108,1

1. 효소활성 최적 pH=107,108,1

2. 효소의 pH 안정성=108,109,1

3. 효소활성 최적온도=109,110,1

4. 효소의 열 안정성=110,111,1

5. 효소의 기질 특이성=111,112,4

제9절 효소를 이용한 isoflavone rich fraction 추출=115,116,1

1. 대두,대두박 및 대두분 내의 isoflavone 함량 조사=115,116,1

2. Isoflavone rich fraction 추출 공정 검토=115,116,2

제10절 Isoflavone rich fraction의 기능성 식품화 및 재료화=117,118,1

1. Isoflavone rich fraction을 첨가한 비스킷 제조=117,118,7

2. Isoflavone rich fraction을 첨가한 식초 제조=123,124,2

제4장 발효 대두제품으로부터 약리활성 물질의 분리 및 동정=125,126,1

제1절 서론=125,126,2

제2절 Isoflavone 간편 분석법 확립=126,127,1

1. 새로운 분석법 확립의 필요성=126,127,1

2. 대두 중 isoflavone 함량 분석법의 확립=126,127,2

3. 검량선의 작성=127,128,2

4. Isoflavone 함량 분석을 위한 최적 추출조건 확립=128,129,3

제3절 항치매 활성 측정법의 확립 및 활성물질의 추출ㆍ정제=131,132,1

1. Prolyl endopeptidase 저해활성 측정법의 확립=131,132,2

2. 발효 대두의 PEP 저해 활성=132,133,2

3. Prolyl endopeptidase 저해 활성물질 추출 및 정제=133,134,3

4. 활성화합물의 구조동정=135,136,11

제4절 혈전 생성 억제활성 측정법 확립=145,146,1

1. 혈전 억제활성 assay법 확립의 필요성=145,146,2

2. Thrombin time assay (TT)법의 확립=146,147,1

3. Partial thromboplastin time assay (aPTT)법의 확립=146,147,2

4. 발효 대두에서 혈전형성 억제활성 검정=147,148,3

5. 항혈전 억제활성 측정시 시료의 전처리법 확립=149,150,2

제5절 혈전생성 억제 활성 성분의 분획=150,151,1

1. 항혈전 성분의 분획 및 이화학적 성상 검토=150,151,3

제6절 혈전 용해 활성의 측정=152,153,2

제7절 항산화 활성의 측정=153,154,2

제8절 발효 산물의 약리 작용의 증감 및 유무의 판별,비교=155,156,1

1. 항치매 활성의 증감 유무의 판별=155,156,1

2. 발효에 의한 혈전형성 억제 활성의 증감유무의 판별=155,156,2

3. 발효에 의한 혈전용해 활성 및 항산화 활성 증감유무의 판별=156,157,1

제9절 유기용매 의한 간단하고 수율이 우수한 isoflavone 대량 추출법 검토=157,158,4

제10절 동정된 활성 화합물의 활성 기작 검토=161,162,1

1. 활성 성분의 IC50 value=161,162,1

2. 활성성분의 효소저해 양상=161,162,2

제11절 시작품의 isoflavone 및 유효성분 분석법 확립에 의한 품질관리법 개발=162,163,1

1. 발효대두의 품질관리법 개발=162,163,2

2. Isoflavone 합유 식초의 품질 관리법 개발=163,164,1

제12절 보존기간별 함량변화에 따른 유효기간 기준 마련=164,165,1

1. 발효 대두의 보존 기간에 따른 isoflavone 함량변화=164,165,1

2. 식초의 보존기간에 따른 isoflavone 함량변화 검토=165,166,1

제5장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도=166,167,1

제1절 총괄추진계획표=166,167,1

제2절 연구개발 목표의 달성도=167,168,1

1. 제1세부과제=167,168,3

2. 제2세부과제=169,170,3

제6장 연구개발결과의 활용계획=172,173,1

제1절 활용분야 및 활용 방안=172,173,1

1. 활용분야=172,173,1

2. 활용방안=172,173,1

제2절 현장 보급방안,산업화 계획 방안 및 기술이전 방안=172,173,2

제3절 추가 기술개발 방안=173,174,1

제4절 연구개발 결과의 활용=173,174,1

제7장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보=174,175,2

제8장 참고문헌=176,177,8

영문목차

[title page etc.]=0,1,27

CONTENTS=27,28,12

Chapter 1. Summary of project=39,40,1

1-1. Objective and necessity=39,40,3

1-2. Contents and scopes=41,42,3

Chapter 2. Status of technical development inside and outside of nation=44,45,1

1-1. Status of the related techniques=44,45,3

1-2. The related research and problems and status of technical level expected in nation after this project=47,48,4

Chapter 3. Development of fermentation bacteria for the production of biofunctional soybean product=51,52,1

3-1. Introduction=51,52,4

3-2. Materials and methods=55,56,1

1. Materials=55,56,1

2. Medium and culture condition=56,57,1

3. Determination of hydrolizing activity for isoflavone glucosides by the isolates=56,57,2

4. Assay of isoflavone glucosidase by the isolates=57,58,2

5. Polymerase chain reaction (PCR)=58,59,1

6. Preparation of soybean paste=59,60,1

7. Purification of enzyme=59,60,2

8. Determination of protein=60,61,1

9. Electrophoresis of protein=60,61,1

10. Determination of molecular mass=60,61,1

3-3. Isolation and selection of bacteria=61,62,1

1. Isolation of bactena=61,62,1

2. Selection of bacteria=61,62,12

3. Identification of the isolates=72,73,8

4. Preservation of the selected strains=79,80,3

3-4. Determination of fermentation condition=81,82,1

1. Second degradation of genistein and daidzein durinf fermentation by the isolates=81,82,2

2. Effect of temperature on the fermentation=82,83,2

3. Effect of salt adding time on the fermentation=84,85,3

4. Time course of hydrolysis of isoflavone glucosides during fermentation=87,88,2

5. Optimal inoculum for the fermentation=88,89,2

3-5. Effect of salts and additives on the fermentation=89,90,1

1. Salt concentration=89,90,3

2. Additives=91,92,1

3. Concentration of additives=92,93,1

4. Mixed fermentation=93,94,2

5. Experimental scale fermentation=94,95,2

3-6. Fermentation process for the fermented soybean product at large scale=96,97,2

3-7. Purification of isoflavone glycosidase in Bacillus sp. K123-1=98,99,1

1. Culture time for the production of isoflavone glucosidase=98,99,1

2. Ammonium sulfate precipitation=99,100,2

3. DEAE Sephadex A-50 ion exchange column chromatography=100,101,2

4. Sephacryl S-200 HR gel chromatography=102,103,1

5. Fast Protein liquid chromatography(FPLC)=102,103,3

6. Purity of the purified isoflavone glucosidase=105,106,1

7. Determination of molecular mass=106,107,1

3-8. Properties of the purified isoflavone glucosidase=107,108,1

1. Optimal pH=107,108,1

2. pH stability=108,109,1

3. Optimal temperature=109,110,1

4. Thermal stability=110,111,1

5. Substrate specificity=111,112,4

3-9. Extraction of isoflavone rich fraction by treatment with enzyme=115,116,1

1. Content of isoflavones in soybean,soybean chip and soybean flour=115,116,1

2. Extraction process of isoflavone rich fraction=115,116,2

3-10. Isoflavone rich fraction for the biofunctional food materials=117,118,1

1. preparation of biscuit enriched isoflavone rich fraction=117,118,7

2. preparation of vinegar enriched isoflavone rich fraction=123,124,2

Chapter 4. Isolation and identification of biologically active compounds from fermented soybean products=125,126,1

4-1. Introduction=125,126,2

4-2. Establishment of a convenience isoflavone analysis method=126,127,1

1. Necessity of establishment of new analysis method=126,127,1

2. Establishment of isoflavone analysis method in soybean=126,127,2

3. Standard curves of isoflavones=127,128,2

4. Establishment of optimal pre-treatment protocols for the analysis of isoflavone contents=128,129,3

4-3. Isolation and identification of anti-dementia compounds from fermented soybeans=131,132,1

1. Setting up of prolyl endopeptidase assay system=131,132,2

2. Inhibitory activity of fermented soybeans against PEP=132,133,2

3. Extraction and purification of PEP inhibitors=133,134,3

4. Identification of PEP inhibitors=135,136,11

4-4. Setting up of anti-coagulating assay system of fermented soybean=145,146,1

1. Necessity of establishment of anti-coagulating assay system=145,146,2

2. Setting up thrombine time assay system=146,147,1

3. Setting up partial thromboplastin time assay system=146,147,2

4. Inhibitory activity of fermented soybeans against coagulation=147,148,3

5. Establishment of pre-treatment protocols for anti-coagulation assay=149,150,2

4-5. Fractionation of anti-coagulant=150,151,1

1. Partial purification and characterization of anti-coagulating fraction=150,151,3

4-6. Analysis of fibrinolytic activity of fermented soybeans=152,153,2

4-7. Measurement of antioxidant activity of fermented soybeans=153,154,2

4-8. Comparison of biological activities before and after fermentation of soybeans=155,156,1

1. Comparison of anti-dementia activity before and after fermentation=155,156,1

2. Compadson of anti-coagulant activity before and after fermentation=155,156,2

3. Comparison of fibrinolytic and antioxidant activity before and after fermentation=156,157,1

4-9. Studies on the large scale extraction of flavonoids from fermented soybeans=157,158,4

4-10. Investigation of mode of inhibitory action=161,162,1

1. IC50(이미지참조) value of active compounds=161,162,1

2. Investigation of inhibition pattern=161,162,2

4-11. Establishment of qualify control protocols by analyzing bologically active compounds in a trial products=162,163,1

1. Establishment of quaEty control protocols for fermented soybeans=162,163,2

2. Establishment of quality control protocols for vinegar containing isoflavone rich fraction=163,164,1

4-12. Establishment of expiration date by monitoring isoflavonoid contents=164,165,1

1. Comparison of isoflavonoid contents according to storage date in fermented soybean products=164,165,1

2. Comparison of isoflavonoid contents according to storage date in vinegar containing isoflavone=165,166,1

Chapter 5. Research goals and contribution in the related field=166,167,1

5-1. General plan for the research=166,167,1

5-2. Accomplishment of reasearch goal=167,168,1

1. Pirst sub-project=167,168,3

2. Second sub-project=169,170,3

Chapter 6. Application plans of the results in this project=172,173,1

6-1. Application fields and plans=172,173,1

1. Application fields=172,173,1

2. Application plans=172,173,1

6-2. Plans for distribution indusrialization,and transfer of technology=172,173,2

6-3. Additional plans for technical development=173,174,1

6-4. Application of the results=173,174,1

Chapter 7. Overseas information of science and technology collected during the research=174,175,2

Chapter 8. References=176,177,8