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목차

표제지=0,1,1

제출문=1,2,1

요약문=2,3,8

SUMMARY=10,11,8

CONTENTS=18,19,3

목차=21,22,2

제1장 연구개발과제의 개요=23,24,2

제2장 국내외 기술개발 현황=25,26,2

제3장 연구개발수행 내용 및 결과=27,28,1

제1절 연구개발수행 내용=27,28,1

1. 특이 항체 생성을 위한 항원의 탐색 및 제조=27,28,1

1) 항원의 탐색=27,28,2

2) 항원 peptide 제조=28,29,2

3) 유전자 재조합 기술에 의한 항원의 대량생산=29,30,1

① 한우 특이 단백질 유전자의 확보=29,30,2

② 발현 vector의 구성 및 발현 조건 설정=30,31,3

③ 특이 단백질의 대량 확보=32,33,3

2. 특이 항체 생성 및 검출=35,36,1

1) 흰쥐(Sprague-Dawley rat)를 이용한 예비시험=35,36,1

① 시험동물=35,36,1

② 항원의 준비와 면역주사=35,36,2

③ 항혈청 및 육즙의 생산=36,37,3

2) 면양에서의 특이항체 생성=38,39,1

① 시험동물 및 면역화 과정=38,39,2

② 항혈청 및 육즙의 생산=39,40,3

③ Affinity column을 통한 항체의 정제=41,42,1

④ 최적의 항체검출 조건 설정=41,42,2

3) 브랜드육 식별 기술 개발을 위한 한우 면역화 시험=42,43,1

① One-shot 처리구=42,43,3

② Boosting 처리구=44,45,2

3. 한우 브랜드육 식별 진단 rapid kit의 제조=45,46,1

1) 항체 생성을 위한 다양한 조건 탐색=45,46,1

2) ELISA 및 Dot-blot을 통한 항체 생성도 측정=45,46,2

3) Gold conjugate의 제조=47,48,1

4) Assay strip의 제조=47,48,1

5) Half test=47,48,2

6) Prototype kit의 준비=48,49,1

제2절 연구개발수행 결과=49,50,1

1. 항원의 선발 및 제작=49,50,1

1) 항원의 선발=49,50,1

2) 유전자 재조합 기술을 이용한 항원의 대량 생산=49,50,4

2. 특이 항체 생성 및 검출=52,53,1

1) 흰쥐(Sprague-Dawley rat)을 이용한 예비시험=52,53,4

2) 면양을 이용한 육즙 내 항체 생산 시험=56,57,10

3) 브랜드육 식별 기술 개발을 위한 한우 면역화 시험=65,66,7

3. 한우 브랜드육 식별 진단 rapid kit의 제조=72,73,1

1) 최적의 항체 형성을 위한 조건 탐색=72,73,1

① 항원 주사량이 항체 형성에 미치는 영향 조사=72,73,2

② Boosting이 항체 형성에 미치는 영향 조사=73,74,2

③ Alum 및 FCA와 같은 Adjuvant의 선택이 항체 형성에 미치는 영향=74,75,1

2) Rapid kit 제조=75,76,1

① Rapid kit의 strip 제조를 위한 조건 탐색=75,76,2

② Dot blot을 이용한 조건 탐색=76,77,1

③ 육즙의 희석배율에 따른 strip에서의 반응 변화=76,77,5

제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도=81,82,2

제5장 연구개발결과의 활용계획=83,84,1

제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보=84,85,1

제7장 참고문헌=85,86,5

영문목차

[title page etc.]=0,1,18

CONTENTS=18,19,5

Chapter 1. Introduction=23,24,2

Chapter 2. The present status of domestic and foreign technology=25,26,2

Chapter 3. Contents and results of the study=27,28,1

Part I. Contents of the study=27,28,1

1. Screening and synthesis of antigens to produce specific antibodies=27,28,1

1) Screening of antigens=27,28,2

2) Synthesis of antigenic peptides=28,29,2

3) Production of the antigens using recombinant DNA technology=29,30,1

① Cloning of genes responsible to specific proteins of Hanwoo=29,30,2

② Establishment of conditions for vector expression=30,31,3

③ Production of specific proteins=32,33,3

2. Antibody production and detection=35,36,1

1) Preliminary study using Sprague-Dawley rats=35,36,1

① Experimental animals=35,36,1

② Preparation of antigens and immunization=35,36,2

③ Production of antiserum and meat juices=36,37,3

2) Development of specific antibodies in sheep=38,39,1

① Experimental animals and immunization=38,39,2

② Production of antiserum and meat juices=39,40,3

③ Purification of antibodies using affinity column=41,42,1

④ Establishment of optimum conditions to detect antibodies=41,42,2

3) Immunization of Hanwoo to identify branded Hanwoo beef=42,43,1

① One-shot treatment=42,43,3

② Boosting treatment=44,45,2

3. Development of rapid kit to identify Hanwoo beef=45,46,1

1) Screening of various conditions to develope antibody=45,46,1

2) ELISA and Dot blot analysis=45,46,2

3) Preparation of gold conjugate=47,48,1

4) Preparation of the immunostrip=47,48,1

5) Preparation of half test=47,48,2

6) Preparation of prototype kit=48,49,1

Part II. Results of the study=49,50,1

1. Screening and synthesis of antigens=49,50,1

1) Screening and synthesis of antigens using data base=49,50,1

2) Production of antigens using recombinant DNA technology=49,50,4

2. Development and detection of specific antibody=52,53,1

1) Preliminary study using Sprague-Dawley rats=52,53,4

2) Development of antibody in meat juice of sheep=56,57,10

3) Immunization of Hanwoo to identify branded beef=65,66,7

3. Development of rapid diagnostic kit to identify branded Hanwoo beef=72,73,1

1) Screening of optimum conditions to develope antibody=72,73,1

① Effects of the amount of antigens=72,73,2

② Effects of boosting injection=73,74,2

③ Effects of adjuvants=74,75,1

2) Development for rapid kit=75,76,1

① Screening of conditions to make strip for rapid kit=75,76,2

② Screening of conditions using dot blot=76,77,1

③ Changes in reaction in strip according to dilution factors of meat juice=76,77,5

Chapter 4. Degree of attainment and contribution to the related field=81,82,2

Chapter 5. Application plan of the results of this study=83,84,1

Chapter 6. Foreign technical information collected during this R&D=84,85,1

Chapter 7. Reference=85,86,5

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