목차

[표제지]=0,1,1

제출문=1,2,1

보고서 초록=2,3,1

요약문=3,4,4

Summary=7,8,4

Contents=11,12,3

목차=14,15,3

제1장 연구개발 과제의 개요=17,18,7

제2장 국내외 기술개발 현황=24,25,5

제3장 연구개발 수행 내용 및 결과=29,30,1

1. 연구 수행방법=29,30,2

2. 연구내용=30,31,1

1. Candida Albicans 유래 Chitin Syntase 1 및 Glyoxylate Cycle 관련 효소(Isocitrate Lyase, Malate Synthase) 저해제의 탐색 체계=30,31,1

가. Candida Albicans 유래 Chitin Syntase 1 저해제의 탐색 체계=30,31,1

1) 조효소액의 조제=30,31,1

2) 효소의 활성 검정=30,31,2

나. Candida albicans 유래 Glyoxylate Cycle 관련 효소 저해제의 탐색 체계=31,32,1

1) 조 효소액의 조제=31,32,1

2) Glyoxylate cycle 관련 효소(Isocitrate Lyase, Malate Synthase)의 활성 검정=31,32,2

2. 효소 저해 활성물질의 탐색=32,33,1

가. 미생물로부터 활성 저해물질의 탐색=32,33,1

나. 식물체로부터 활성 저해물질의 탐색=32,33,1

다. Chemical Library로부터 활성 저해물질의 탐색=33,34,1

3. 활성 저해물질의 생산균주의 동정 및 발효=33,34,1

가. Chitin Synthase 1 활성 저해물질 생산균주의 선별과 균주 동정=33,34,1

1) 균주 선발=33,34,1

2) 균주 동정=33,34,1

3) 배양=33,34,1

나. Glyoxylate Cycle 관련 효소 활성 저해물질 생산균주의 선별 및 균주 동정=34,35,1

1) 균주 선발=34,35,1

2) 균주 동정=34,35,1

4. 효소 활성 저해물질의 분리 정제 및 구조 분석=34,35,1

가. 효소 활성 저해물질의 분리 정제=34,35,1

나. 효소 활성 저해 물질의 구조 분석=34,35,1

5. Berberine으로부터 Berberrubine 유도체의 합성=34,35,1

가. Berberine으로부터 Berberrubine의 합성=34,35,2

나. 9-O-acyl 및 alkyl Berberrubine 유도체(3-16) 합성=35,36,1

다. Benzyl Berberine과 Benzyl Berberrubine 유도체(17-28)의 합성=35,36,1

라. 9-O-alkyl, 13-Substituted Benzyl Berberrubine Iodide나 Bromide 유도체(29-60)의 합성=36,37,1

마. 9-O-alkyl, 13-Substituted Benzyl Berberrubine Chloride 유도체들(61-92)의 합성=36,37,1

6. 진균류에 대한 최소 생육저지 농도(MIC)의 측정=36,37,1

가. 사용한 피검균=36,37,1

나. 배지=36,37,1

다. 접종 균액의 조제=36,37,2

라. 측정 방법=37,38,1

7. 급성 독성시험=37,38,1

3. 연구 수행 결과=38,39,1

1. C. Albicans 유래 Chitin Synthase 1 효소 저해제의 탐색=38,39,1

가. 방선균 A6705 균주의 동정=38,39,1

1) 다양한 배지조건에 따른 배양학적 특성=38,39,2

2) 형태학적 특성=40,41,1

3) 생리적 특성=40,41,2

4) 방선균 A6705 균주의 Chemotaxonomy=42,43,1

나. Streptomyces sp. 방선균 A6705 균주의 배양=42,43,3

다. 효소 활성 저해물질의 분리 정제=44,45,2

라. 효소 활성 저해물질의 구조결정=45,46,1

1) 화합물 A6705-1과 A6705-2의 물리화학적 특성=45,46,2

2) 화합물 A6705-1과 A6705-2의 구조결정=46,47,5

마. A6705-1과 2 화합물의 효소 활성 검정=50,51,1

바. 최소 생육저지 농도(MIC)의 결정=51,52,1

2. Berberine과 Berberrubine 유도체들의 합성 및 활성검정=51,52,1

가. Berberrubine의 합성=51,52,1

나. 9-O-acyl And alkyl Berberubine 유도체(3-16)의 합성=51,52,3

다. 13-Substituted Benzyl Berberine과 13-Substituted Benzyl Berberrubine 유도체(17-28)의 합성=53,54,3

라. 9-O-acyl, 13-Substituted Benzyl Berberrubine Iodide나 Bromide유도체(29-60)의 합성=55,56,6

마. 9-O-acyl, 13-Substituted Benzyl Berberrubine Chloride 유도체들(61-92)의 합성=60,61,6

바. Berberine 과 Berberrubine 유도체들의 항진균 활성 검정=66,67,1

1) 9-O-acyl 및 alkyl Berberubine 유도체들(3-16)의 진균류에 대한 항균력 검정=66,67,1

2) 13번 탄소가 치환된 Benzyl Berberine 및 Berberubine 유도체들(17-28)의 진균류에 대한 항균력 검정=66,67,3

3) 9-O-alkyl, 13-Substituted Benzyl Berberrubine Iodide나 Bromide 유도체들(29-60)의 진균류에 대한 항균력 검정=68,69,2

4) 9-O-alkyl, 13-Substituted Benzyl Berberrubine Chloride 유도체들(61-92)의 진균류에 대한 항균력 검정=69,70,1

5) 9-O-butyl, 13-(Isopropyl Benzyl) Berberrubine Chloride(72) 화합물을 이용한 Candida Albicans 균주의 생육 억제 형태 조사=69,70,4

6) Candida Albicans 유래 Chitin Synthase 1에 대한 Berberine과 Berberrubine 유도체들의 저해활성 검정=72,73,2

7) Berberine과 Berberrubine 유도체들의 급성 독성시험=73,74,1

3. Chemical Library 탐색을 통해 도출한 IPBC 화합물과 그 유사 화합물들의 활성 검정=74,75,1

가. IPBC와 그 유사 화합물들의 인체 병원균에 대한 항균력 검정=74,75,2

나. IPBC와 그 유사 화합물들의 Candida Albicans 유래 Chitin Synthase 1에 대한 저해 활성 검정=75,76,1

4. Candida Albicans 유래 Glyoxylate Cycle 효소 저해제의 탐색=76,77,1

가. Glyoxylate Cycle 효소(Isocitrate Lyase, Malate Synthase) 저해제 탐색 체계 확립=76,77,1

1) 조효소액의 조제=76,77,1

2) Glyoxylate Cycle에 관여하는 효소(Isocitrate Lyase 및 Malate Synthase) 활성에 미치는 제반 인자=77,78,5

3) Isocitrate Lyase의 효소 활성 검정에 미치는 제반인자=81,82,1

4) Malate Synthase의 효소 활성검정=81,82,4

나. Glyoxylate Cycle 관련 효소 저해제의 탐색=85,86,1

1) 미생물의 2차 대사산물로부터 Glyoxylate Cycle 관련 효소 저해제의 탐색=85,86,1

2) 곰팡이 F3121 균주가 생산하는 Glyoxylate Cycle 관련 효소 저해제의 분리정제=85,86,1

① 곰팡이 F3121 균주의 동정=85,86,2

② 곰팡이 F3121 균주가 생산하는 Glyoxylate Cycle 관련 효소 저해제의 분리정제=86,87,1

③ 곰팡이 F3121이 생산하는 활성물질 622ML-3의 구조결정=87,88,2

④ 분리한 화합물의 Glyoxylate Cycle 효소에 대한 저해 활성 검정=89,90,1

3) 히어리로(Corylopsis Coreana)부터 Glyoxylate Cycle 관련 효소 저해제의 분리=90,91,7

4)/3) 히어리로(Corylopsis Coreana)부터 분리된 Tellimagrandin I의 효소 저해활성 검정=96,97,2

5)/3) 히어리(Corylopsis Coreana)로부터 분리된 Tellimagrandin I의 항진균 활성 검정=98,99,2

6)/4) Chemical Library로부터 Glyoxylate Cycle 관련 효소에 저해 활성을 나타내는 화합물의 탐색 및 활성검정=99,100,3

제4장 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도=102,103,5

제5장 연구개발 결과의 활용계획=107,108,1

제6장 연구개발 과정에서 수집한 해외 과학기술 정보=108,109,1

제7장 참고문헌=109,110,5

위탁과제 : 키틴 합성 효소 저해제의 분자설계 및 합성=114,115,1

제출문=115,116,1

보고서 초록=116,117,1

요약문=117,118,2

Summary=119,120,2

Contents=121,122,2

목차=123,124,2

제1장 연구개발 과제의 개요=125,126,2

제2장 국내외 기술개발 현황=127,128,3

제3장 연구개발 수행 내용 및 결과=130,131,1

1. 연구 수행방법=130,131,1

2. 연구내용=131,132,1

1. Candida Albicans 유래 Chitin Syntase 1 저해제의 탐색 체계=131,132,1

가. Candida Albicans 유래 Chitin Synthase 1 저해제의 활성 검정=131,132,1

1) 조효소액의 조제=131,132,1

2) 효소의 활성 검정=131,132,1

2. 효소 활성 저해물질의 분리 정제 및 구조 분석=131,132,1

가. 효소 활성 저해물질의 분리 정제 및 구조 분석=131,132,2

나. 효소 활성 저해 물질의 구조 분석=132,133,1

3. Obovatol 유도체의 합성=132,133,1

4. 진균류에 대한 최소 생육저지 농도(MIC)의 측정=132,133,1

가. 사용한 피검균=132,133,1

나. 배지=132,133,1

다. 접종 균액의 조제=132,133,1

라. 측정 방법=132,133,1

3. 연구결과=133,134,1

1. 일후박(Magnolia Obovata Thunb)으로부터 Obovatol의 분리정제=133,134,1

가. 활성 저해물질의 분리정제=133,134,1

나. 분리한 활성 저해물질의 구조결정=133,134,7

2. Obovatol 유도체의 합성=140,141,1

가. 오보바톨 유도체 합성을 위한 히드록시기 보호 방법 연구=140,141,1

1) 오보바톨 유도체 합성을 위한 카테콜 고리의 히드록시기 보호 방법 연구=140,141,1

2) 분리된 오보바톨의 히드록시기 보호 방법 연구=141,142,1

나. 바이아릴 에테르(Bi-aryl Ether) 구조를 지닌 오보바톨 유도체의 합성=141,142,1

1) 일후박으로부터 분리된 오보바톨을 이용한 유도체 합성=141,142,2

2) Copper Triflate를 촉매로 한 Obovatol 유도체의 합성=142,143,1

3) Demethylation에 의한 오보바톨 유도체의 합성=143,144,1

다. Ether 결합을 Thio Ether 결합으로 변형한 Obovatol 유도체의 합성=143,144,2

라. Ether 결합을 제거한 Obovatol 유도체의 합성=144,145,1

마. 소수성을 증대시킨 오보바톨 유도체의 합성=145,146,1

바. 합성된 오보바톨 유도체들의 항진균 활성 검정=146,147,1

사. Obovatol 유도체들의 Candida Albicans 유래 Chitin Synthase 1에 대한 활성 검정=146,147,3

제4장 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도=149,150,1

제5장 연구개발 결과의 활용계획=150,151,1

제6장 연구개발 과정에서 수집한 해외 과학기술 정보=151,152,1

제7장 참고문헌=152,153,1

영문목차

[title page etc.]=0,1,7

Summary=7,8,4

Contents=11,12,6

Chapter1. Introduction=17,18,7

Chapter2. State Of The Art Report=24,25,5

Chapter3. Contents And Results Of Research=29,30,1

1. Methods Of Research=29,30,2

2. Contents Of Research=30,31,1

1. Screening Systems For Chitin Synthase 1 Inhibitors And Enzyme Inhibitors Responsible For Glyoxylate Cycle Of Candida Albicans=30,31,1

(1) Screening System For Chitin Synthase 1 Inhibitors From C. Albicans=30,31,2

(2) Screening System For Enzyme Inhibitors Responsible For Glyoxylate Cycle Of C. Albicans=31,32,2

2. Screening Of Enzyme Inhibitors=32,33,1

(1) Screening Of Enzyme Inhibitors From Microorganisms=32,33,1

(2) Screening Of Enzyme Inhibitors From Plants=32,33,1

(3) Screening Of Enzyme Inhibitors From Chemical Library=33,34,1

3. Identification And Fermentation Of Enzyme Inhibitor-Producing Microorganisms=33,34,1

(1) Selection And Identification Of Chitin Synthase 1 Inhibitor-Producing Microorganisms=33,34,1

(2) Selection And Identification Of Glyoxylate Cycle Inhibitor-Producing Microorganisms=34,35,1

4. Isolation, Purification, And Structure Determination Of Enzyme Inhibitors=34,35,1

(1) Isolation And Purification Of Enzyme Inhibitors=34,35,1

(2) Structure Determination Of Enzyme Inhibitors=34,35,1

5. Synthesis Of Berberrubin Derivatives From Berberine=34,35,1

(1) Synthesis Of Berberrubin Derivatives=34,35,2

(2) Synthesis Of 9-O-Acyl And Alkyl Berberrubin Derivatives=35,36,1

(3) Synthesis Of Benzyl Berberine And Benzyl Berberrubin Derivatives=35,36,1

(4) Synthesis Of 9-O-Alkyl, 13-Benzyl Berberrubin Derivatives=36,37,1

(5) Synthesis Of 9-O-Alkyl, 13-Benzyl Berberrubin Chloride Derivatives=36,37,1

6. Determination Of Minimal Inhibitory Concentration(MIC) Against Human Pathogenic Fungi=36,37,1

(1) Test Organisms=36,37,1

(2) Medium=36,37,1

(3) Preparation Of Inoculum=36,37,2

(4) Deformination Of MIC=37,38,1

7. Acute Toxicity Test=37,38,1

3. Resuits=38,39,1

1. Screening Of Chitin Synthase 1 Inhibitors From Candida Albicans=38,39,1

(1) Identification Of Strain A6705=38,39,1

1) Cultural Characterization Of Strain A6705 On Culture Media=38,39,2

2) Morphological Characterization Of Strain A6705=40,41,1

3) Physiological Characterization Of Strain A6705=40,41,2

4) Chemotaxonomy Of Strain A6705=42,43,1

(2) Fermentation Of Streptomyces sp. A6705=42,43,3

(3) Isolation And Purification Of Chitin Synthase 1 Inhibitors=44,45,2

(4) Structure Determination Of Chitin Synthase 1 Inhibitors=45,46,1

1) Physico-Chemical Properties Of Compounds A6705-1 And A6705-2=45,46,2

2) Structure Determination Of Compounds A6705-1 And A6705-2=46,47,5

(5) Assay Of Compounds A6705-1 And A6705-2=50,51,1

(6) Determination Of Minimum Inhibitory Concentration=51,52,1

2. Synthesis Of Berberine And Berberrubin Derivatives=51,52,1

(1) Synthesis Of Berberrubin=51,52,1

(2) Synthesis Of 9-O-Acyl And Alkyl Berberrubin Derivatives=51,52,3

(3) Synthesis Of Benzyl Berberine And Benzyl Berberrubin Derivatives=53,54,3

(4) Synthesis Of Benzyl Berberrubin Iodide Or Bromide Derivatives=55,56,6

(5) Synthesis Of Benzyl Berberrubin Chloride Derivatives=60,61,6

(6) Antifungal Activities Of Berberine And Berberrubin Derivatives=66,67,1

1) Antifungal Activities Of 9-O-Acyl And Alkyl Berberrubin Derivatives=66,67,1

2) Antifungal Activities Of Benzyl Berberine And Benzyl Berberrubin Derivatives=66,67,3

3) Antifungal Activities Of 9-O-Acyl And Alkyl Berberrubin Derivatives=68,69,2

4) Antifungal Activities Of 9-O-Acyl, 13-Benzyl Berberrubin Chloride Derivatives=69,70,1

5) Growth Inhibition Pattern Of 9-O-Acyl, 13-(Isopropyl Benzyl) Berberrubin Chloride=69,70,4

6) Inhibitory Activities Of Berberine And Berberrubin Derivatives Against Chitin Synthase 1 Of C. Albicans=72,73,2

7) Acute Toxicities Of Berberine And Berberrubin Derivatives=73,74,1

3. Inhibitory Activities Of IPBC And Its Analogue Compounds Selected From Screening Of Chemical Library=74,75,1

(1) Antifungal Activities Of IPBC And Its Analogue Compounds Against Various Human Pathogenic Fungi=74,75,2

(2) Inhibitory Activities Of IPBC And Its Analogue Compounds Against Chitin Synthase 1 Of Candida Albicans=75,76,1

4. Screening Of Inhibitors For Enzymes Responsible For The Glyoxylate Cycle Of Candida Albicans=76,77,1

(1) Establishment Of Screening System Of Inhibitors For Enzymes Responsible For The Glyoxylate Cycle=76,77,1

1) Preparation Of Crude Enzyme=76,77,1

2) Factors Affecting The Enzyme Activity Responsible For The Glyoxylate Cycle=77,78,5

3) Factors Afffecting The Enzyme Activity Of Isocitrate Lyase=81,82,1

4) Assay Of Malate Synthase=81,82,4

(2) Screening Of Inhibitors Far Enzyme Responsible For The Glyoxylate Cycle=85,86,1

1) Screening Of Compounds With Inhibitory Activity From Microbial Secondary Metabolites=85,86,1

2) Isolation And Purification Of Compounds With Inhibitory Activity From Fungus F3121=85,86,1

① Structure Determination Of Compounds With Inhibitory Activity From Fungus F3121=85,86,2

[② Inhibitory Activity Of Compounds From Fungus F3121 etc.]=86,87,3

④ Isolation And Purification Of Compounds With Inhibitory Activity From Corylopsis Coreana=89,90,1

3) Structure Determination Of Compounds With Inhibitory Activity From Corylopsis Coreana=90,91,7

4) Inhibitory Activity Of Tellimagrandin I Isolated From Corylopsis Coreuna=96,97,2

5) Antifungal Activity Of Tellimagrandin I Isolated From Corylopsis Coreana=98,99,2

6) Screening Of Compound With Inhibitory Activity From Chemical Library=99,100,3

Chapter4. Accomplishment And Contribution=102,103,5

Chapter5. Future Applications=107,108,1

Chapter6. Science And Technology Information Collected From Foreign Countries Through The Project=108,109,1

Chapter7. References=109,110,5

[Design And Synthesis Of Chittin Synthases etc.]=114,115,5

Summary=119,120,2

Contents=121,122,4

Chapter1. Introduction=125,126,2

Chapter2. State Of The Art Report=127,128,3

Chapter3. Contents And Results Of Research=130,131,1

1. Methods Of Research=130,131,1

2. Contents Of Research=131,132,1

1. Screening Systems For Chitin Synthase 1 Inhibitors=131,132,1

(1) Screening System For Chitin Synthase 1 Inhibitors From C. Albicans=131,132,1

1) Preparation Of Crude Enzyme=131,132,1

2) Assay Of Enzyme=131,132,1

2. Isolation, Purification, And Structure Determination Of Enzyme Inhibitors=131,132,1

(1) Isolation And Purification Of Enzyme Inhibitors=131,132,2

(2) Structure Determination Of Enzyme Inhibitors=132,133,1

3. Synthesis Of Obovatol Derivatives=132,133,1

4. Determination Of Minimal Inhibitory Concentration(MIC) Against Human Pathogenic Fungi=132,133,1

(1) Test Organisms=132,133,1

(2) Medium=132,133,1

(3) Preparation Of Inoculum=132,133,1

(4) Determination Of MIC=132,133,1

3. Results=133,134,1

1. Isolation And Purification Of Obovatol From Magnolia Obovata=133,134,1

(1) Identification Of Obovatol=133,134,1

(2) Structure Determination Of Obovatol=133,134,7

2. Synthesis Of Obovatol Derivatives=140,141,1

(1) Protection Method Of Hydroxy Group For The Synthesis Of Obovatol Derivatives=140,141,2

(2) Synthesis Of Obovatol Derivatives With Biaryl Ether Structure=141,142,3

(3) Synthesis Of Obovatol Derivatives Changed Ether Bond To Thio Ether Bond=143,144,2

(4) Synthesis Of Obovatol Derivatives With A Removed Ether Bond=144,145,1

(5) Synthesis Of Obovatol Derivatives With An Increased Hydrophobicity=145,146,1

(6) Antifungal Activities Of Obovatol Derivatives=146,147,1

(7) Inhibitory Activity Of Obovatol Derivatives Against Chitin Synthase 1 Of Candida Albicans=146,147,3

Chapter4. Accomplishment And Contribution=149,150,1

Chapter5. Future Applications=150,151,1

Chapter6. Science And Technology Information Collected From Foreign Countries Through The Project=151,152,1

Chapter7. References=152,153,1