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용역연구개발과제 최종보고서

목차

최종보고서 요약문 6

Summary 8

총괄연구개발과제 연구결과 10

제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 10

1.1. 총괄연구개발과제의 목표 10

1.1.1. 연구의 배경 및 필요성 10

1.1.2. 연구의 목표 및 범위 17

1.2. 총괄연구개발과제의 목표달성도 18

1.3. 국내·외 기술개발 현황 20

제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 22

2.1. 뇌졸중 동물모델의 안정적인 제작 및 확보 22

2.2. 헌팅톤병 동물모델의 안정적인 제작 및 확보 22

2.3. 이식에 이용될 세포의 준비 23

2.4. 세포이식의 조건 결정 24

2.5. MRI 측정방법의 결정 및 MRI를 이용한 이식된 세포의 in vivo imaging 24

2.6. 최종적인 조직학적 분석을 통한 이식된 세포의 생체 내에서의 운명 조사 25

제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과 26

3.1. MCAo 뇌졸중 동물모델의 안정적인 제작 및 이의 확인 26

3.2. 이식에 이용될 세포의 준비 26

3.3. human neural stem cell line (HB1.F3)을 MCAo모델에 이식한 후 MRI 조사 27

3.4. human neural stem cell line (HB1.F3.BDNF)을 MCAo모델에 이식한 후 MRI 조사 31

3.5. human ESC 유래 신경전구체를 MCAo 모델에 이식한 후 MRI 조사 32

3.6. Huntington's disease 동물모델의 제작 및 이의 확인 33

3.7. 헌팅톤병 동물모델에 human neural stem cell line (HB1.F3)을 이식한 후 MRI를 이용한 생체내에서의 분포 및 이동 조사 34

3.8. 헌팅톤병 동물모델에 human ESC 유래 neural precursor를 이식한 후 MRI를 이용한 생체내에서의 분포 및 이동 조사 35

제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 및 고찰 및 결론 37

제5장 총괄연구개발과제의 연구성과 39

제6장 기타 중요변경사항 40

제7장 참고문헌 41

제8장 첨부서류 43

총괄 연구과제 요약 59

뇌졸중 및 헌팅톤병 모델에서의 자기공명영상법 (MRI)을 이용한 세포치료제의 체내에서의 동태확인 61

초록보기

본 연구에서는 대표적인 난치성 신경계질환인 뇌졸중 및 헌팅톤병 질환모델을 대상으로 줄기세포 이식치료 효과에 대한 보다 체계적이고 객관적인 평가법 개발을 위한 노력의 일환으로, 자기공명영상법 (MRI)을 이용하여 이식된 줄기세포의 체내에서의 효력 및 생체분포 시험법 확립을 위한 일련의 연구를 수행했음.

1) Rat를 이용한 뇌질환동물모델의 안정적인 확보

-middle cerebral artery occlusion (MCAo) 방법에 의한 뇌졸중 모델 및 quinolinic acid (QA) 주입을 통한 헌팅톤병 모델을 제작했으며, 조직학적 분석을 통한 병변부위 및 정도의 확인을 거쳐, 행동학적 검사를 통해 상기 제작된 모델의 적합성을 확인한 후 이식실험에 사용했음.

2) 이식에 이용될 세포의 준비 및 세포이식의 조건 결정

-인간배아줄기세포 유래의 신경전구체 및 인간 신경줄기세포를 대상으로 bisbenzimide로 prelabeling하거나 Feridex를 처리했으며, 이식된 줄기세포의 병변부위로의 이동여부를 조사하기 위해 ipsi-lateral 주입뿐만 아니라 contra-lateral 주입도 실시했음, 세포이식 시기는 뇌졸중 및 헌팅톤병 공히 병변유발일로부티 1주일이 경과된 시점에서 진행했음.

3) MRI 측정방법의 결정 및 MRI를 이용한 이식된 세포의 생체내에서의 동태분석

-주로 T2, T2* imaging 기법을 사용하여 세포이식후 최소 4~8주간 주입된 세포의 이동 경로를 추적했으며, 이 결과 이식된 세포의 상당부분이 병변부위로 이동됨을 관찰할 수 있었음.

-병변크기의 변동 등 세포이식에 따른 변화를 조사했으나 두드러진 차이점을 관찰할 수 없었음. 또한 행동학적 검사를 통해 기능성회복여부를 조사했으나 큰 변화는 관찰되지 않았음.

4) 최종적인 조직학적 분석을 통한 이식된 세포의 생체내에서의 운명조사

-bisbenzimide signal, human nuclei antibody staining, Prussian blue staining 등을 이용하여 세포이식후 생체내에서의 생존, 이동, 생착, 분화 정도 및 종양형성 유무를 조사했는데, 생존, 이동, 생착 정도는 관찰되었지만, 분화정도는 극히 낮았으며, 종양형성은 전혀 관찰되지 않았음.

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자기공명영상법을 이용한 뇌졸중 및 헌팅톤병 줄기세포치료제 효력 및 생체분포 시험 이용현황 표 - 등록번호, 청구기호, 권별정보, 자료실, 이용여부로 구성 되어있습니다.
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