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SUMMARY

CONTENTS

목차

제1장 연구개발과제의 개요 12

제1절 연구개발의 목적 및 필요성 12

제2절 연구개발의 범위 12

제2장 국내외 기술개발 현황 13

제1절 세균의 정족수 인식 (Quorum sensing) 시스템 연구 13

1. 신호물질 (Autoinducer) 연구 13

2. Quorum sensing과 세균병 15

3. Quorum sensing에 의한 Biofilm 형성 및 항생제 내성 15

제2절 새로운 항감염제 개발을 위한 Anti-Quorum sensing 전략 15

1. QS 신호전달 교란을 위한 AHL 유사체 17

제3절 AHL 신호물질의 효소적 분해를 통한 Quorum quenching 및 이를 이용한 무름병 제어 18

1. 효소적 분해를 통한 신호물질의 불활성화 18

2. Quorum quenching 효소를 이용한 식물 세균병 억제 18

3. AHL-lactonase의 세포내 및 생태계에서의 기능연구 19

4. 국내 연구 현황 21

제3장 연구개발수행 내용 및 결과 22

제1절 신규 AHL 분해효소 및 유전자의 발굴 22

1. Nocardioides sp. OS4의 AHL 분해능 조사 22

2. Nocardioides sp. OS4 유래 AHL 분해효소의 특성화 22

3. AHL 분해효소 유전자의 cloning 및 ahlN 유전자 분석 24

4. Bacillus thuringiensis에서 ahlN의 heterologous expression 28

5. 재조합 AhlN의 활성과 기질 특이성 29

6. AhlN 발현에 의한 E. carotovora의 병발 억제 효과 30

제2절 AHL-lactonase의 기질 선택성과 관련된 다양한 변이효소의 구축 및 특성화 31

1. Site-directed mutagenesis를 통한 B. thuringiensis AHL-lactonase 변이 효소 구축 및 정제 31

2. AHL-lactonase 변이 단백질의 고발현 및 분리 정제 33

3. 다양한 길이의 acyl side chain을 가진 AHLs에 대한 기질특이성 변화 35

4. I73V 변이단백질에 대한 Differential Scanning Calorimetry (DSC) 분석 38

제3절 AHL-lactonase의 세포내 및 생태계에서의 기능 규명 39

1. B. thuringiensis subsp. israelensis 4Q7의 aiiA 유전자 knockout 변이주 제조 39

2. B. thuringiensis 야생주와 aiiA 변이주의 phenotype 비교 분석 40

3. B. thuringiensis 야생주와 aiiA knockout 변이주의 proteome 분석 41

4. 근권 생태계에서의 Population dynamics 분석을 통한 B. thuringiensis 유래 AHL-lactonase의 기능연구 42

5. AHL-lactonase의 B. thuringiensis spore 표면 발현을 이용한 병발 억제 연구 44

가. B. thuringiensis spore에 AHL-lactonase의 발현 확인 44

나. AiiA 단백질의 spore 표면발현 및 active form 확인 44

다. Spore의 보관기간 및 온도별 활성변화 조사 45

라. AHL-lactonase를 표면발현 시킨 B. thuringiensis spore를 이용한 병발 억제 test 46

제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 47

1. 연구개발의 최종목표 47

2. 연차별 연구개발 목표 및 내용 47

3. 계획대비 달성도 48

4. 위 연구목표(총연구기간)에서 중요도 순으로 4-5개 목표 추출 및 가중치 부여 49

제5장 연구개발결과의 활용계획 50

제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 51

제7장 참고문헌 52

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Quorum sensing 신호물질 분해효소의 기능 및 개량 연구와 이를 이용한 작물 세균병 방제 기술 개발 이용현황 표 - 등록번호, 청구기호, 권별정보, 자료실, 이용여부로 구성 되어있습니다.
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