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This study was carried out to study the survival rate of thawed Hanwoo embryos frozen by the slow-rate freezingor the cryotop vitrification method. Hanwoo cumulus-oocyte complexes were recovered from ovaries at a slaughter house, matured for 20~22 hours, fertilized with Hanwoo semen for 5~6 hours, and cultured for 7~9 days in 38.5℃,5% CO2 incubator. For freezing, Day 7∼9 blastocysts were collected. Embryos for the slow-rate freezing wereequilibrated in 1.8 M ethylene glycol (EG) with Dulbecco's phosphate-buffered saline (D-PBS). Programmable cellfreezer was precooled down to -7℃, and the straw was seeded during 8 minutes-holding time, and was cooled to -35℃ at the cooling rate of 0.3℃/min, and then was plunged and stored in liquid nitrogen. Embryos for the cryotopvitrification were treated in TCM199 with 0.5 M sucrose, 16% EG, 16% dimethylsulfoxide (DMSO). Embryos werethen loaded individually onto cryotop and plunged directly into liquid nitrogen. The survival rates of embryos frozenby these two freezing methods were evaluated at 12 to 24h post-thawing. The survival rates of frozen/thawed Hanwooembryos by the cryotop vitrification method (56.86 ± 26.53%) were slightly higher than those by the slow-rate freezingmethod (55.07 ± 26.43%) with no significant difference. Using the cryotop vitrification and the slow-rate freezing ofHanwoo blastocysts on Day 7 following in-vitro fertilization (IVF) treatment, the survival rates of frozen/thawedHanwoo embryos were 72.65 ± 18.3% and 79.06 ± 17.8%, respectively. The survival rates by the cryotop vitrificationwere higher than those by the slow-rate freezing on both Day 8 and 9 with significantly higher survival rate on Day9 (p<0.05). Using the cryotop vitrification and the slow-rate freezing of Hanwoo embryos to compare between threedifferent blastocyst stages, the survival rates of the blastocyst stage embryos were 66.22 ± 18.8% and 45.76 ± 12.8%,respectively with higher survival rate by the vitrification method (p<0.05). And the survival rate of expandedblastocysts was higher than those of early blastocysts and blastocysts in two freezing methods with significantly highersurvival rate by the slow-rate freezing method (p<0.05).

권호기사

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기사명 저자명 페이지 원문 목차
한국산 고라니의 발정기와 임신기 난소의 생리학적 차이 김상환, 이호준, 이주영, 박용수, 윤종택 pp.43-50

Effect of 7,8-Dihydroxyflavone on In Vitro Maturation of Oocytes in Pigs Seung-Kyu Oh, Don Buddika Oshadi Malaweera, Sisitha Ramachandra, 신상태, 조종기 pp.67-71

한우 농장별 번식기록 분석을 통한 번식률 제고 사례 연구 김의형, 정기용, 이승환, 유일선, 강희설 pp.7-12

칡소 씨수소의 MC1R 유전자형과 자손의 모색 발현 박재희, 이창우, 최재원, 이해이, 최연호, 권아남, 지연희, 김종국 pp.21-27

Establishment of Efficient Microinjection System in the Porcine Embryos Don Buddika Oshadi Malaweera, Sisitha Ramachandra, Jun-Bo Wu, Seung Kyu Oh, Seung-Hwan Kim, Seok-Joong Kim, 신상태, 조종기 pp.59-66

Vitamin K1의 첨가가 돼지 체외 수정란의 발달과 생존율에 미치는 효과 박흠대, 주역진, 박용수 pp.73-81

미니돼지 정자 동결 보존에 Tea-N-Tris의 첨가가 체외 수정 및 MMPs 활성에 미치는 영향 김상환, 강현아, 박용수, 윤종택 pp.83-90

미성숙 난자의 체외 성숙 시 다양한 체세포의 공동 배양 효과 윤준철, 김은혜, 황선웅, 채련, 현상환 pp.1-5

선발된 아프리카와 아시아 국가들을 위한 가축유전자원 정보시스템 구축 Tadelle Dessie, Grum Gebreyesus, Yetnayet Mamo, 김동훈, 조경래, 정현정, Okeyo Mwai, 오성종 pp.29-33

한우 수정란의 간이 동결을 위한 유리화 동결법에 관한 연구 이해이, 김상훈, 김용준 pp.13-19

반복적인 과배란 처치 경험이 있는 한국흑염소에서 난포 자극 및 복강경을 이용한 난포란 채취(LOPU) 이용범, 이두수, 조상철, 신상태 pp.35-41

Scanning Electrochemical Microscopy를 이용한 한우 체내 수정란의 호흡률 조사 김현, 복난희, 김성우, 도윤정, 김민규, 조상래, 성환후, 김동훈, 고응규 pp.91-99

Trehalose에 의하여 동결 건조된 정자의 돼지 난자 내 직접주입 후 체외 배발달 강화형, 이지웅, 강만종, 문승주, 김광현 pp.51-57

참고문헌 (27건) : 자료제공( 네이버학술정보 )

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번호 참고문헌 국회도서관 소장유무
1 Ice-free cryopreservation of mouse embryos at -196 degrees C by vitrification. 네이버 미소장
2 Optimization of a simple vitrification procedure for bovine embryos produced in vitro: effect of developmental stage, two-step addition of cryoprotectant and sucrose dilution on embryonic survival 네이버 미소장
3 Development into blastocysts of bovine oocytes cryopreserved by ultra-rapid cooling. 네이버 미소장
4 Massip A, Mermillod P and Dhmyes A. 1995. Morphology and biochemistry of in-vitro produced bovine : implications for their cryopreservation. Hum. Reprod. 10: 3004-3011. 미소장
5 Effect of sugars-addition on the survival of vitrified bovine blastocysts produced in vitro 네이버 미소장
6 Survival and development of bovine blastocysts produced in vitro after assisted hatching, vitrification and in-straw direct rehydration 네이버 미소장
7 Open pulled straw (OPS) vitrification: A new way to reduce cryoinjuries of bovine ova and embryos 네이버 미소장
8 김상근, 박상훈, 석호봉. 2000. 소 수정란의 vitrification 동결 보존시 동결보호제의 종류 및 배 발달 단계가 생존성에 미치는 영향에 관한 연구. 한국수정란이식학회지 24: 225-230. 미소장
9 김인덕, 안미현, 석호봉. 2004. 미성숙돼지 난자의 유리화동결에 관한 연구 ; OPS, EMG, NLS의 비교. 한국수정란이식학회지 19:27-34. 미소장
10 김정익, 유재원, 박춘근, 양부근, 정희태. 1998. 동결액의 평형 방법과 희석방법이 초자화 동결된 소 체외수정란의 생존성에 미치는 영향. 한국수정란이식학회지 13: 313-321. 미소장
11 Comparison on Vitrification of Mouse Oocytes and Embryos Using Closed Pulled Straws (CPS), Conventional Straws and Open Pulled Straws (OPS) 소장
12 Comparison of Developmental Efficiency Following Cryopreservation of Hanwoo Embryos 소장
13 Ultrastructure of IVM-IVF Bovine Blastocysts Vitrified after Equilibration in Glycerol 1,2-Propanediol Using 2-Step and 16-Step Procedures 네이버 미소장
14 Kelly J, Kleemann D, Kuwayama M and Walker S. 2006. Effect of cysteinamine on survival of bovine and ovine oocytes vitrified using the minimum volume cooling (MVC) cryotop method. Reprod. Fertil. Dev. 18: 158 (Abstr). 미소장
15 Kobayashi K, Nagashima H, Yamakawa H, Kato Y and Ogawa S. 1990. The survival of whole and bisected rabbit morulae after cryopreservation by the vitrification method. Cryobiology 31: 415-422. 미소장
16 Highly efficient vitrification for cryopreservation of human oocytes and embryos: The Cryotop method 네이버 미소장
17 Kuwayama M, Vajta G, Ieda S and Kato O. 2005. Vitrification of human embryos using the Cryo TipTM method. Reprod. Biomed. 11: 608-614. 미소장
18 Vitrification of mouse oocytes using a nylon loop 네이버 미소장
19 Factors affecting cryosurvival of nuclear-transferred bovine and swamp buffalo blastocysts: effects of hatching stage, linoleic acid–albumin in IVC medium and Ficoll supplementation to vitrification solution 네이버 미소장
20 Successful vitrification of day-6 sheep embryos 네이버 미소장
21 Bogliolo L, Ariu F, Rosati I, Zedda MT, Pau S, Naitana S, Leoni G, Kuwayama M. and Ledda S. 2006. Vitrification of immature and in vitro matured horse oocytes. Reprod Fertil. Dev. 18: 149-150(Abstr). 미소장
22 Cohen C. 1988. Pregnancies after Human Oocyte Cryopreservation. Ann. NY Acad. Sci. 541-549. 미소장
23 Effect of vitrification media on the in vitro development of porcine embryos 네이버 미소장
24 Cryopreservation of porcine embryos derived from in vitro-matured oocytes. 네이버 미소장
25 Gardner DK, Weissman A, Howles CM and Shoham Zeev. 2004. Textbook of Assisted Reproductive Techniques. 2nd ed. Taylor & Francies. United Kingdom, pp. 257-289. 미소장
26 Successful vitrification of pronuclear-stage rabbit zygotes by minimum volume cooling procedure 네이버 미소장
27 Isachenko V, Monlag M, Isachenko E, Zaeva V, Krivokharchenko I, Shafei R and van der Ven H. 2005. Aseptic technology of vitrification of human pronuclear oocytes using open-pulled straws. Hum. Reprod. 20: 492-496. 미소장

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